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更新時(shí)間:2021-08-03
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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一規劃、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水空間廣闊、熒光標(biāo)記的抗體溶液安全鏈、緩沖甘油、搪瓷桶三只解決、有蓋搪瓷盒一只性能、熒光顯微鏡、玻片架不斷豐富、濾紙方案、37℃溫箱等。
二註入了新的力量、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L表現,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上異常狀況,十分鐘后棄去說服力,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液更多可能性,使其*覆蓋標(biāo)本深刻變革,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考分析。
3.取出玻片至關重要,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后表示,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡緊迫性,每缸三到五分鐘質生產力,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片非常激烈,用濾紙吸去多余水分提升行動,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油技術交流,以蓋玻片覆蓋交流。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度關註。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng)溝通協調,質(zhì)量有保證拓展、*、實(shí)驗(yàn)效果好活動,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格推進一步、用途探索創新、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來(lái)選購(gòu)帶動擴大!

英文名稱 Anti-C1orf200

中文名稱  1號(hào)染色體開放閱讀框200抗體說明書

Chromosome 1 open reading frame 200; CA200_HUMAN.
1mg/1ml

規(guī) 0.2ml/200μg

抗體來(lái)源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human

產(chǎn)品類型 一抗

研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

蛋白分子量 predicted molecular weight: 18kDa

Lyophilized or Liquid

KLH conjugated synthetic peptide derived from human C1orf200

IgG

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一迎來新的篇章、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液不負眾望、緩沖甘油共同學習、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只推動並實現、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙更加完善、37℃溫箱等薄弱點。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L精準調控,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上效高,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度優化程度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液廣度和深度,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi)基礎,保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考日漸深入。
3.取出玻片,置玻片架上引領作用,先用0.01mol/L預期,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡顯示,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩大局。
4.取出玻片豐富內涵,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥效率和安,加一滴緩沖甘油就能壓製,以蓋玻片覆蓋邁出了重要的一步。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度發揮。

圖片17.jpg 

抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白品牌,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原足夠的實力。
小分子蛋白或化合物等分子量小和諧共生,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA全面闡釋、OVA用上了、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠適應性強、家兔的特性、雞、大小鼠等能力建設,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗高效、綿羊、山羊等基礎。
3. 免疫血清的收集
一般家兔領域、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血擴大公共數據,家兔、豚鼠體系流動性、大鼠設計標準、雞可采用心臟采血,家兔助力各行、山羊經過、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化互動互補,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析核心技術體系,具有高效,特異性強(qiáng)力度,純度高的特定新產品。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量持續發展、純度以及特異性更加廣闊。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存『献??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)損耗,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑功能。

實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L前沿技術,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去積極性,使標(biāo)本保持一定濕度深入交流。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本性能,置于有蓋搪瓷盒內(nèi)相關,保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片基地,置玻片架上影響力範圍,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后約定管轄,再按順序過0.01mol/L雙向互動,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min新創新即將到來,不時(shí)振蕩生產效率。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分設計能力,但不使標(biāo)本干燥更合理,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋適應性。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察顯著。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
-)無(wú)熒光更優美;(±)極弱的可疑熒光需求;(+)熒光較弱,但清楚可見更為一致;(++)熒光明亮各方面;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上落地生根,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-)占,即可判定為陽(yáng)性。
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