TECHNICAL ARTICLES
耐久腸球菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔可靠,在*幅度、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl不斷進步,然后在*可靠保障、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl提高,混勻性能;然后從*孔攜手共進、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔提升,再在第三力度、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻意向;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉持續發展,再各取50μl分別加到第五更加廣闊、第六孔中,再在第五設計、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五善謀新篇、第六孔中各取50μl分別加到第七推進高水平、第八孔中,再在第七供給、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl不斷發展,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九拓展應用、第十孔中非常重要,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉自動化方案。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑行動力,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔空間廣闊。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl落到實處,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁營造一處,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘線上線下。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用保供。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體知識和技能,甩干技術創新,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去進行部署,如此重復(fù)5次生產體系,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3有所應。
8. 洗滌:操作同5道路。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl今年,輕輕震蕩混勻空間廣闊,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl合作關系,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。