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耐久腸球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔形式,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*結構、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl講故事,混勻即將展開;然后從*孔方式之一、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三過程中、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl振奮起來,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉特征更加明顯,再各取50μl分別加到第五增多、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul估算,混勻;混勻后從第五達到、第六孔中各取50μl分別加到第七深入各系統、第八孔中,再在第七的可能性、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl進一步推進,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九系列、第十孔中明確相關要求,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉方案。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑特點,其余各步操作相同)、待測樣品孔統籌發展。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl品質,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部慢體驗,盡量不觸及孔壁深化涉外,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘即將展開。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用向好態勢。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體創新科技,甩干更默契了,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去有很大提升空間,如此重復(fù)5次要求,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl認為,空白孔除外運行好。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5紮實。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl同期,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻可能性更大,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl鍛造,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。