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人原激活肽(TAP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒物聯與互聯。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干充分發揮,每孔加洗滌液350μl共享,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體全面展示,在厚的吸水紙上拍干姿勢。洗板5次。
實驗開始前體系,各試劑均應(yīng)平衡至室溫足夠的實力;試劑或樣品配制時,均需充分混勻提高,并盡量避免起泡全面闡釋。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔結構、待測樣品孔適應性強。空白孔加樣品稀釋液100μl競爭力所在,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl能力建設,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部先進的解決方案,盡量不觸及孔壁基礎,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜堅持好,37℃孵育2小時開放要求。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液構建。
2.棄去液體緊密相關,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)平臺建設,酶標(biāo)板加上覆膜重要組成部分,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體先進技術,甩干傳承,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘趨勢,大約350μl /每孔高效流通,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干預判。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜有力扭轉,37℃溫育1小時調解製度。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干形式,洗板5次覆蓋範圍,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl功能,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長前沿技術,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時積極性,即可終止)深入交流。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)性能,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色動力。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)方案。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源多種方式,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序實施體系。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束是目前主流。