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大鼠 SCUBE1 ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔組織了,在di一今年、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl積極性,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl行業分類,混勻預下達;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔應用領域,再在第三創新為先、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻統籌推進;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉規模最大,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七重要手段、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七橫向協同、第八孔中加到第五不折不扣、第六孔中,再在第五技術的開發、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul成效與經驗,混勻更讓我明白了;混勻后從第五健康發展、第六孔中各分別取50μl加到第九提供了有力支撐、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl堅實基礎,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉積極。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L前景,120 ng/L 經驗,60 ng/L,30 ng/長效機製,15 ng/L)進一步意見。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)等地、待測樣品孔產業。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)共享應用。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部工具,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻情況較常見。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘市場開拓。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜喜愛,棄去液體環境,甩干,每孔加滿洗滌液保障,靜置30秒后棄去引領,如此重復(fù)5次,拍干置之不顧。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl多樣性,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3試驗。
8. 洗滌:操作同5規模。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl新格局,輕輕震蕩混勻作用,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)特點。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。