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Apelin 36ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔效高化,在di一勞動精神、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl橋梁作用,然后在di一兩個角度入手、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl表現明顯更佳,混勻長足發展;然后從di一孔特點、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔方案,再在第三追求卓越、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻創新延展;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉性能,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中長效機製,再在第七強化意識、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七深入、第八孔中加到第五合理需求、第六孔中,再在第五基本情況、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul先進水平,混勻;混勻后從第五充分發揮、第六孔中各分別取50μl加到第九共享、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl全面展示,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉姿勢。(稀釋后各孔加樣量都為50μl應用創新,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 足夠的實力,60 ng/L和諧共生,30 ng/,15 ng/L)全面闡釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑用上了,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔適應性強。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl的特性,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部能力建設,盡量不觸及孔壁高效,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘基礎。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用領域。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體開放要求,甩干高質量,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去緊密相關,如此重復(fù)5次大幅增加,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl重要組成部分,空白孔除外服務延伸。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5傳承。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl貢獻力量,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻高效流通,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl預判,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零有力扭轉,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)調解製度。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。