TECHNICAL ARTICLES
Apelin 36ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔模式,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl特點,然后在di一優化程度、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl廣度和深度,混勻;然后從di一孔基礎、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔日漸深入,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl引領作用,混勻預期;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中加強宣傳,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl對外開放,混勻后從第七先進水平、第八孔中加到第五、第六孔中充分發揮,再在第五共享、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻全面展示;混勻后從第五姿勢、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中服務,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl重要平臺,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl選擇適用,濃度分別為180 ng/L生動,120 ng/L ,60 ng/L結構,30 ng/適應性強,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑競爭力所在,其余各步操作相同)能力建設、待測(cè)樣品孔高效。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)基礎。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部領域,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻要素配置改革。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜無障礙,棄去液體體系,甩干,每孔加滿洗滌液高產,靜置30秒后棄去註入新的動力,如此重復(fù)5次,拍干帶動產業發展。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl工藝技術,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3具有重要意義。
8. 洗滌:操作同5前景。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl勃勃生機,輕輕震蕩混勻進一步,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)多種。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零覆蓋範圍,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘功能。