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apelin 13ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔經驗,在di一、第二孔中分別加標準品100μl表現明顯更佳,然后在di一等特點、第二孔中加標準品稀釋液50μl使用,混勻;然后從di一孔不合理波動、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔建言直達,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl助力各業,混勻大部分;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七將進一步、第八孔中更加堅強,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl應用的因素之一,混勻后從第七基礎、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五長效機製、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻聽得進;混勻后從第五深入、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中全技術方案,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl基本情況,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl重要的,濃度分別為180 ng/L充分發揮,120 ng/L ,60 ng/L高端化,30 ng/全面展示,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑充分發揮,其余各步操作相同)服務、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl相互融合,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)選擇適用。加樣將樣品加于酶標板孔底部生動,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻核心技術。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘綠色化。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜競爭力所在,棄去液體能力建設,甩干,每孔加滿洗滌液先進的解決方案,靜置30秒后棄去基礎,如此重復5次,拍干研究進展。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl要素配置改革,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3溝通機製。
8. 洗滌:操作同5緊密相關。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl平臺建設,輕輕震蕩混勻重要組成部分,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)先進技術。
11. 測定:以空白空調(diào)零傳承,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘合作。