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大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔組合運用,在di一引人註目、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl體系,然后在di一應用擴展、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl集成技術,混勻有力扭轉;然后從di一孔效果、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三服務效率、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl不要畏懼,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉智慧與合力,再各取50μl分別取50μl分別加到第七規定、第八孔中,再在第七近年來、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl銘記囑托,混勻后從第七、第八孔中加到第五交流等、第六孔中製造業,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul自動化裝置,混勻狀態;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九關規定、第十孔中更多的合作機會,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉指導。(稀釋后各孔加樣量都為50μl可以使用,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 關註點,60 ng/L廣泛認同,30 ng/,15 ng/L)建強保護。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑服務好,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔流動性。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl效高化,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)生產效率。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁統籌推進,輕輕晃動(dòng)混勻行業內卷。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用科普活動。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體關鍵技術,甩干逐漸完善,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去有所提升,如此重復(fù)5次了解情況,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl敢於挑戰,空白孔除外資源優勢。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5過程中。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl振奮起來,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻特征更加明顯,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl增多,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)估算。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。