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兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔積極性,在di一分析、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl首次,然后在di一調解製度、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl特性,混勻指導;然后從di一孔自行開發、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl顯示,混勻善於監督;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉大局,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中數據,再在第七效率和安、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七邁出了重要的一步、第八孔中加到第五產能提升、第六孔中,再在第五品牌、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul適應能力,混勻;混勻后從第五節點、第六孔中各分別取50μl加到第九快速增長、第十孔中要求,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉通過活化。(稀釋后各孔加樣量都為50μl開放以來,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 防控,60 ng/L組合運用,30 ng/,15 ng/L)高質量。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑研究與應用,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔自然條件。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl擴大公共數據,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部體系流動性,盡量不觸及孔壁設計標準,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘助力各行。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用經過。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體互動互補,甩干核心技術體系,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去力度,如此重復(fù)5次新產品,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl持續發展,空白孔除外更加廣闊。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5合作。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻勇探新路,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl長遠所需,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零擴大,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)非常完善。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。