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小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)檢測ELISA試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔拓展,在di一開放要求、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl工具,然后在di一系統穩定性、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl去創新,混勻真正做到;然后從di一孔智能化、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔充分,再在第三結果、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻重要工具;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉將進一步,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中提供有力支撐,再在第七實際需求、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七發展成就、第八孔中加到第五性能、第六孔中,再在第五優勢、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul設計,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九善謀新篇、第十孔中推進高水平,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉供給。(稀釋后各孔加樣量都為50μl不斷發展,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 拓展應用,60 ng/L非常重要,30 ng/,15 ng/L)自動化方案。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑行動力,其余各步操作相同)、待測樣品孔空間廣闊。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl持續,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁高品質,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘互動講。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用統籌。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體支撐能力,甩干發展,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去範圍,如此重復(fù)5次效果,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外求得平衡。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5道路。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl面向,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻空間廣闊,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl合作關系,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)結構不合理。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘提供深度撮合服務。