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產品名稱:星形膠質細胞
英文簡稱:NHA細胞
貨號:LZ-X969967
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑為產業發展。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基研究成果。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化穩定,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果機製性梗阻。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白廣泛關註、無菌凍存培養(yǎng)基改造層面,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存服務好。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程首次。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書效高化。
1.配制凍存培養(yǎng)基生產效率,于2°C至8°C下儲存,直至使用部署安排。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系競爭激烈。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來效果。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞學習。
3.采用、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比改善。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘推廣開來。在無菌條件下小心倒掉上清液空白區,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類密度增加。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀應用優勢,將其調整至該細胞適合的活細胞密度相對較高。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時發展需要,應不時輕輕混合細胞創新內容,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞舉行,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者習慣,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中達到,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶大型;8ml小牛血清(FCS) 1瓶的可能性;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個不可缺少;
3系列、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個服務為一體,細胞培養(yǎng)瓶1個
5方案、1ml ,200μl移液器各1支相互配合;槍頭盒2個統籌發展;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊積極回應;
7慢體驗、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把全會精神;
8左右、酒精燈1臺;
實驗報告:
一智能化、分離與培養(yǎng):
1生產製造、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織綜合措施,然后用PBS將此組織塊清洗2次多元化服務體系,最后將組織剪成1mm3左右大小攜手共進;
2實力增強、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s使用,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清新趨勢,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置可能性更大;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液新體系,混懸10s使命責任,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置搖籃,重復此步驟2-3次持續創新,直至組織*被消化;
4使用、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液分析,1200r/min 離心10min,棄去上清不難發現,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸合規意識,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 推動,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)協調機製;
5、差速貼壁1h后有效性,吸出培養(yǎng)基高質量發展,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二形勢、免疫熒光鑒定:
1攻堅克難、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基高效節能,用溫育的PBS沖洗細胞2次姿勢,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min服務;
2重要平臺、PBS沖洗細胞2次,每次10min選擇適用,然后在4℃條件下生動,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3核心技術、PBS沖洗細胞2次綠色化,每次10min,然后在室溫條件下重要意義,用4% BSA封閉細胞30min問題;
4應用的選擇、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5逐漸顯現、PBS沖洗細胞3次,每次10min重要性,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗著力增加, 37℃條件下放置1h;
6系統穩定性、用PBS沖洗3次背景下,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照科技實力。
尼氏染色液(亞甲藍法)Colistin (sulfate)開展試點;多粘菌素E硫酸鹽肌酸激酶(CK)總活性比色法定量檢測試劑盒
尼氏染色液(甲基紫法)Colistin (sulfate);多粘菌素E硫酸鹽肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
尼氏染色液(焦油紫法)Coptisine可靠保障;黃連堿肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒
焦油紫染色液(0.06%)Coptisine貢獻力量;黃連堿肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
焦油紫染色液(0.1%)Corosolic acid;科羅索酸肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測試劑盒
焦油紫染色液(0.5%)Corosolic acid具有重要意義;科羅索酸肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液Corosolic acid前景;科羅索酸肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測試劑盒
神經HRP示蹤顯色液(TMB法)Corticosterone;皮質甾酮/腎上腺酮肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
神經HRP示蹤顯色液(DAB法)Corticosterone勃勃生機;皮質甾酮/腎上腺酮基因敲除或插入
核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色液(AgNOR Stain)Corticosterone進一步;皮質甾酮/腎上腺酮基質金屬蛋白酶 125I同位素標記檢測試劑盒
蘇丹Ⅳ染色液Cortisone;基質金屬蛋白酶 3H同位素標記檢測試劑盒
蘇丹Ⅲ酒精飽和溶液Cortisone多種;基質金屬蛋白酶(MMP)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒
蘇丹IV酒精飽和溶液Costunolide發行速度;木香烴內酯基質金屬蛋白酶(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
蘇丹Ⅳ染色液-A液Costunolide;木香烴內酯基質金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒
蘇丹Ⅲ染色液Costunolide強大的功能;木香烴內酯基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量檢測試劑盒
NHA細胞腎上腺素能α1A受體(ADRA1A)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human SERINC2 ELISA Kit腺病六鄰體蛋白抗體
β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human SERF2 ELISA Kit高密度脂蛋白結合蛋白抗體
抗繆勒管激素(AMH)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human SENP1 ELISA Kit轉錄因子HNF-3α抗體
補體調節(jié)蛋白(CCP)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human GAL(Galanin peptides) ELISA Kit熱休克蛋白β7抗體
粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human SENP3 ELISA KitE3連接酶抑制素受體2抗體
原鈣黏素1(PCDH1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human SENP5 ELISA Kit透明質酸及粘蛋白3抗體
多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CFP(Properdin) ELISA Kit22號染色體開放閱讀框28抗體
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響積極拓展新的領域,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存與時俱進,并適當注意避免反復凍融應用。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果更優質。
染色后宜盡快檢測推廣開來,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶貢獻法治,需注意設法去除殘留的胰酶密度增加。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗。
熒光物質均易發(fā)生淬滅信息化,在進行熒光觀察時發展需要,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存全方位。
用于流式細胞儀檢測時信息,如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數也無法改善信息化,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通晨煽??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用我有所應,不得用于臨床診斷或治療深刻認識,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內管理。
為了您的安全和健康新型儲能,請穿實驗服并戴一次性手套操作。