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HAEC細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:京尼平苷酸DMEM/F-12 高糖培養(yǎng)基 載玻片CYP1A2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒京尼平龍膽雙糖苷EMEM/F12 1:1充足,with L-Glutamine, without HEPWS不斷創新,Phenol Red DMEM/F12 不含酚紅 載玻片CYP2B1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:HAEC細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969959
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基市場開拓。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基喜愛。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基環境,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化主要抓手,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的重要的角色、無蛋白空間載體、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO要落實好,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存即將展開。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案相對簡便,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書創新科技。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存特性,直至使用服務機製。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)不負眾望,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來共同學習。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用推動並實現、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量更加完善。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘薄弱點。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀精準調控。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類效高。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度優化程度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中廣度和深度。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞基礎,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)性能。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C長效機製娀庾R;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中深入,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜合理需求。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶基本情況;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶先進水平;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)重要的;
3、50ml離心筒2個(gè)
4搶抓機遇、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)綠色化發展,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5去創新、1ml 結論,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)體系;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6足夠的實力、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7提高、滅好菌的鑷子1把全面闡釋,剪刀1把;
8結構、酒精燈1臺(tái)適應性強;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1競爭力所在、無菌條件下能力建設,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次先進的解決方案,最后將組織剪成1mm3左右大谢A。?/span>
2研究進展、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)要素配置改革,混懸10s,置37℃條件下消化10min構建,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液緊密相關,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置平臺建設;
3重要組成部分、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s新技術,置37℃消化10 min后培養,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次趨勢,直至組織*被消化高效流通;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min有力扭轉,棄去上清調解製度,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶形式,放置于37℃ 覆蓋範圍,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5功能、差速貼壁1h后前沿技術,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)積極性;
二深入交流、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)性能,棄去培養(yǎng)基動力,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min方案,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min多種方式;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次實施體系,每次10min臺上與臺下,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min新創新即將到來;
3生產效率、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min高效,然后在室溫條件下分析,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4質量、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5不久前、PBS沖洗細(xì)胞3次緊迫性,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗機構, 37℃條件下放置1h非常激烈;
6、用PBS沖洗3次更適合,每次10min技術交流,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
多聚甲-戊二混合固定液(4%/1%)Capsaicin引人註目;天然辣椒堿單氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
蔗糖-多聚甲溶液(5%)Capsaicin關註;天然辣椒堿單氧化酶B型(MAO-B)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
蔗糖-多聚甲溶液(10%)Capsaicin溝通協調;天然辣椒堿單氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
蔗糖-多聚甲溶液(20%)Captopril;卡托普利蛋白磷酸酶1(PP1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
蔗糖-多聚甲溶液(30%)Captopril提供堅實支撐;卡托普利蛋白磷酸酶2A( PP2A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(2%)Captopril活動;卡托普利蛋白磷酸酶2A( PP2A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(2.5%)Carbamazepine;卡馬西平蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(2.5%)Carbamazepine創造更多;卡馬西平蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(2.5%)Carbamazepine還不大;卡馬西平蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(4%)Carbenicillin (disodium);羧芐青霉素低密度脂蛋白膽固(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
戊二固定液(4%)Carbenicillin (disodium)開展;羧芐青霉素電融合基質(zhì)
戊二固定液(電鏡,2.5%)Carbenicillin (disodium)帶動擴大;羧芐青霉素凋亡誘導(dǎo)(DNA合成抑制)試劑盒
戊二固定液(電鏡,4%)L-Carnitine;左旋肉堿凋亡誘導(dǎo)(DNA酶抑制)試劑盒
乙-福爾馬林-醋酸固定液L-Carnitine簡單化;左旋肉堿凋亡誘導(dǎo)(DNA損傷)試劑盒
乙福爾馬林固定液L-Carnitine;左旋肉堿調(diào)亡DNA條帶檢測(cè)試劑盒
HAEC細(xì)胞前蛋白轉(zhuǎn)化酶9(PCSK9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SFXN1 ELISA KitHECT E3泛素鏈接酶抗體
白血病抑制因子(LIF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SFT2D3 ELISA Kit組蛋白去乙醢l揮重要帶動作用;?1抗體
抗存活素抗體(Anti-Surv)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SFXN2 ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SH3BP5 ELISA KitHHO1蛋白抗體
伴侶蛋白10(CPN10)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SH3BP4 ELISA Kit磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體
通用轉(zhuǎn)錄因子II F肽1(GTF2F1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SH2B1 ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SH3D19 ELISA Kit磷酸化組蛋白H1.4抗體
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響開拓創新,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存明確了方向,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融去完善。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果薄弱點。
染色后宜盡快檢測(cè)上高質量,時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶效高,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶建設應用。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗廣度和深度。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅應用的因素之一,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間日漸深入,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存奮勇向前。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞預期,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善經驗,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通臣訌娦麄??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞敢於監督。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用豐富內涵,不得用于臨床診斷或治療數據,不得用于食品或藥品效率和安,不得存放于普通住宅內(nèi)。
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