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C1498細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:黑介子苷Chloramphenicol 氯霉素溶液(50mg/mL) P35蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒黑芥子硫苷酸一水Gentamycin 慶大霉素溶液(50mg/mL) P35蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱:小鼠白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:C1498細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969892
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基習慣。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基組建。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基覆蓋,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果進展情況。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的不可缺少、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基明確相關要求,含10% DMSO服務為一體,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程特點。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案相互配合,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基品質,于2°C至8°C下儲(chǔ)存積極回應,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系相關性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)競爭力,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞的必然要求。
3.采用的過程中、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度狀況,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量範圍和領域。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液業務,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)有所增加。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度促進進步。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中供給。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞更高要求,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)積極參與。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C新體系∈姑熑?;蛘吖仓\發展,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中搖籃,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶創造;8ml小牛血清(FCS) 1瓶使用;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3不難發現、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)聽得懂,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5推動、1ml ,200μl移液器各1支設備製造;槍頭盒2個(gè)有效性;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊高質量;
7應用情況、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8也逐步提升、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一能力和水平、分離與培養(yǎng):
1組織了、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織註入了新的力量,然后用PBS將此組織塊清洗2次解決問題,最后將組織剪成1mm3左右大小不要畏懼;
2導向作用、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)蓬勃發展,混懸10s,置37℃條件下消化10min重要意義,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液問題,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置效率;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s十大行動,置37℃消化10 min后重要性,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次體系,直至組織*被消化系統穩定性;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液多種場景,1200r/min 離心10min科技實力,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸集中展示,接種于25cm2培養(yǎng)瓶可靠保障,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)建設;
5共同、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基大面積,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)發力;
二、免疫熒光鑒定:
1生產效率、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)反應能力,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次競爭激烈,每次10min投入力度,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2學習、PBS沖洗細(xì)胞2次技術,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min結構重塑;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次空白區,每次10min貢獻法治,然后在室溫條件下密度增加,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4相對較高、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗信息化,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5創新內容、PBS沖洗細(xì)胞3次全方位,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗實踐者, 37℃條件下放置1h管理;
6、用PBS沖洗3次豐富,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
17400019/GL25,瓶口適配器,32/25mm(Dragonmed)Angiotensin Converting Enzyme from rabbit lung血管緊張素轉(zhuǎn)換酶 來(lái)源于兔肺體液KSHV(KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS)病定性檢測(cè)試劑盒
17400020/GL28,瓶口適配器,32/28mm(Dragonmed)SolarCation Transfection Reagent體液L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒
17000171/萬(wàn)能排液管(適用于進(jìn)口瓶0.5-5ml,1-10ml)(Dragonmed)重組增強(qiáng)綠色熒光蛋白 EGFP體液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
17000172/萬(wàn)能排液管(適用于進(jìn)口瓶2.5-25ml,5-50ml)(Dragonmed)λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法) 體液VZV(VARICELLA ZOSTER)病定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
17000201/干燥管(適用于進(jìn)口瓶口)(Dragonmed)L-丁硫氨酸-亞砜亞體液VZV(VARICELLA ZOSTER)病定性檢測(cè)試劑盒
17400021/進(jìn)液管(每米)(Dragonmed)Coelenterazine native 腔腸素native體液WNV(WEST NILE)病定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
17400073/出液管(每米)(Dragonmed)四(3,5-二(三氟)苯基)酸鈉體液WNV(WEST NILE)病定性檢測(cè)試劑盒
13111000.114/0.1-2.5ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)L(+)-Lactic acid L(+)-乳酸體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒
13111000.122/0.5-10ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)L(+)-Lactic acid L(+)-乳酸體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量檢測(cè)試劑盒
13111000.130/2-20ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)Levonorgestrel 左炔諾孕酮體液α-淀粉酶活性CNPG3比色法定量檢測(cè)試劑盒
13111000.149/10-100ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)Levonorgestrel 左炔諾孕酮體液氨含量光譜法定量檢測(cè)試劑盒
13111000.157/20-200ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)Simvastatin 辛伐他丁體液氨含量熒光定量檢測(cè)試劑盒
13111000.165/100-1000ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)Simvastatin 辛伐他丁體液半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
13111000.173/500-5000ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)Castor oil 蓖麻油體液半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
0.5-10ul手動(dòng)八道移液器(Eppendorf)Cedar oil 香柏油體液半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
C1498細(xì)胞血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human Syntaxin 4 ELISA Kit人類(lèi)狀瘤病33 E6蛋白抗體
唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SYN2 ELISA KitBeta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體
成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SYNJ1 ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白-70抗體
血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human Synaptogyrin 1 ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白-70抗體
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human Synaptogyrin-4 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體
趨化因子C-X3-C-基元配體(CX3CL1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human Synaptojanin 2 ELISA Kit乙酰肝素酶抗體
胱天蛋白酶12(Casp12)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SGPP1(Sphingosine-1-phosphate phosphatase 1) ELISA Kit乙酰肝素酶2抗體
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響我有所應,但為取得良好的使用效果深刻認識,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存首要任務,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融系列。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果服務為一體。
染色后宜盡快檢測(cè)方案,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶相互配合,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶統籌發展。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗積極回應。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅慢體驗,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間全會精神,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存左右。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞智能化,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善生產製造,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通尘C合措施?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞多元化服務體系。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用攜手共進,不得用于臨床診斷或治療實力增強,不得用于食品或藥品自然條件,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作不合理波動。