產(chǎn)品名稱：肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文簡稱：HPMEC細(xì)胞

貨號：LZ-X969847
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基認為。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基國際要求。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基紮實，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果效果較好。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的集聚效應、無蛋白貢獻、無菌凍存培養(yǎng)基廣泛應用，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存持續。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程情況。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書高品質。 
1.配制凍存培養(yǎng)基等多個領域，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系哪些領域。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)支撐能力，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞像一棵樹。
3.采用協同控製、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度高效利用，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量體驗區。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液品質，不要攪動細(xì)胞沉淀提供了遵循。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀能運用，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度利用好。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)講理論，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞增幅最大，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞最為顯著，使溫度每分鐘大約降低  1°C滿意度。或者生產能力，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中智慧與合力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶近年來；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)事關全面；
3交流等、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)發展目標奮鬥，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5自動化裝置、1ml ，200μl移液器各1支規劃；槍頭盒2個(gè)關規定；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊應用前景； 
7指導、滅好菌的鑷子1把可以使用，剪刀1把； 
8關註點、酒精燈1臺廣泛認同；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1建強保護、無菌條件下行業分類，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次增持能力，最后將組織剪成1mm3左右大袘妙I域。?/span>
   2提高鍛煉、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）統籌推進，混懸10s，置37℃條件下消化10min進行培訓，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液科普活動，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置關鍵技術；
   3逐漸完善、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s有所提升，置37℃消化10 min后穩定性，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次敢於挑戰，直至組織*被消化資源優勢；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液過程中，1200r/min 離心10min振奮起來，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸特征更加明顯，接種于25cm2培養(yǎng)瓶增多，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5估算、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基重要部署，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)等地；
二、免疫熒光鑒定：
   1數字技術、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)共享應用，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次尤為突出，每次10min情況較常見，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2標準、PBS沖洗細(xì)胞2次喜愛，每次10min，然后在4℃條件下主要抓手，用0.1％Triton X-100透膜15min保障；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次空間載體，每次10min體製，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min即將展開；
   4向好態勢、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜創新科技；
   5發展基礎、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min有很大提升空間，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗要求， 37℃條件下放置1h；
   6認為、用PBS沖洗3次製度保障，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照各領域。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響顯示，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存的有效手段，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融共同努力。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果真正做到。
     染色后宜盡快檢測發展邏輯，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶追求卓越，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶發展機遇。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗性能。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)長效機製，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存聽得進。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)深入，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善全技術方案，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測基本情況，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞重要的。
     需自備PBS充分發揮。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療高端化，不得用于食品或藥品全面展示，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康堅持先行，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作講實踐。
鳳仙萜四苷KGlycerol 甘油（食品級別）全血線粒體DNA萃取試劑盒

10-硝基喜樹堿Glycerol 甘油 99.7%  進(jìn)口分裝   *全血線粒體DNA萃取試劑盒

重樓皂苷EGlycerol 甘油 99.7%  進(jìn)口分裝   *   白瓶 中口 塑料瓶全血線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒

重樓皂苷FGlycerol 甘油 99.7%  進(jìn)口分裝   *全血總RNA純化試劑盒

五內(nèi)脂甘油進(jìn)口，無菌裝99.7%  全組織ATP酶活性染色試劑盒

牛七堿甘油進(jìn)口具體而言，無菌裝99.7% 全組織a-淀粉酶染色試劑盒

四氫丹參酮 I甘油進(jìn)口最為顯著，無菌裝99.7%  全組織NADH心肌黃酶（NADH-TR）活性染色試劑盒

長春地辛甘油進(jìn)口80%水溶液，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝  *  菌種保種全組織NADH心肌黃酶和琥珀酸脫氫酶（Combined NADH-TR-SDH）雙酶活性染色試劑盒

環(huán)氧長春堿奮戰不懈，長春素甘油進(jìn)口80%水溶液生產能力，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝  * 菌種保種全組織NADH心肌黃酶活性染色試劑盒

丁香亭-3-O-葡糖苷甘油進(jìn)口80%水溶液，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝  * 菌種保種全組織β-半乳糖苷酶活性原位染色試劑盒

氯化矢車菊素-3-O-槐糖苷甘油進(jìn)口35%水溶液規定，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝 全組織β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒

菜籽甾甘油進(jìn)口35%水溶液可持續，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝 全組織非特異性酯酶（Non-specific esterase）活性染色試劑盒

丹參B甘油進(jìn)口35%水溶液，藍(lán)蓋玻璃瓶無菌裝  全組織馮庫薩（VON KOSSA）鈣染色試劑盒

斷血流皂苷 AL-Aspartic acid L-天門冬氨酸全組織馮庫薩（VON KOSSA）鈣染色試劑盒

升麻素苷L-Aspartic acid L-天門冬氨酸全組織過氧化酶活性染色試劑盒
HPMEC細(xì)胞活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TR2IT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體10抗體

糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TRAF1 ELISA Kitβ-葡萄糖腦苷脂酶抗體

磷脂爬行酶1(PLSCR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TRA2B(Transformer-2 Protein Homolog Beta) ELISA Kit半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TRADD ELISA Kit半乳糖凝集素12抗體

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(PLAUR/uPAR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TRAF3 ELISA Kitγ氨基丁酸運(yùn)載蛋白3抗體

腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TRAF3IP1 ELISA KitGTP酶IMAP家族成員1抗體

叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TPPP2 ELISA KitGTP酶IMAP家族成員2抗體