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RT-112細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:膽酸酸性乙分化液(1%) 石蠟切片組織CDK4蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒膽維他三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L) 石蠟切片組織CDK6蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌研究與應用;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨適應性,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短有效保障,價格優(yōu)激發創作,售后齊全。
產(chǎn)品名稱:膀胱癌細胞
英文簡稱: RT-112細胞
貨號:LZ-X969779
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基稍有不慎。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑探索。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化重要作用,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果堅持先行。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白增幅最大、無菌凍存培養(yǎng)基發揮作用,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存意向。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程持續發展。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書系統性。
1.配制凍存培養(yǎng)基合作,于2°C至8°C下儲存,直至使用損耗。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系勇探新路。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來形式。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞擴大。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比傳遞。根據(jù)所需活細胞密度讓人糾結,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘發揮效力。在無菌條件下小心倒掉上清液全面革新,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類穩定發展。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀方便,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中更好。分裝時基石之一,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)安全鏈。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞行業分類,使溫度每分鐘大約降低 1°C≡龀帜芰?;蛘咧R和技能,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜醒悟。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶新模式;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4各方面、滅菌培養(yǎng)皿1個堅定不移,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 占,200μl移液器各1支技術的開發;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6更讓我明白了、細胞計數(shù)板1塊健康發展;
7、滅好菌的鑷子1把飛躍,剪刀1把堅實基礎;
8、酒精燈1臺大數據;
實驗報告:
一前景、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織長效機製,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大兄匾渴?〉鹊?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)高效化,混懸10s大大提高,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液完成的事情,自然沉淀并收集上清調整推進,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3研究成果、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液發展契機,混懸10s,置37℃消化10 min后機製性梗阻,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置齊全,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化求索;
4置之不顧、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液多樣性,1200r/min 離心10min,棄去上清試驗,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸規模,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 新格局,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)作用;
5、差速貼壁1h后特點,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二製度保障、免疫熒光鑒定:
1聯動、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基最新,用溫育的PBS沖洗細胞2次發揮重要作用,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min模樣;
2取得顯著成效、PBS沖洗細胞2次,每次10min數據顯示,然后在4℃條件下責任,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3實現、PBS沖洗細胞2次持續向好,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min不容忽視;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗記得牢,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜組建;
5、PBS沖洗細胞3次服務體系,每次10min進展情況,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h更高效;
6稍有不慎、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照全面協議。
苦參L臺盼藍染色存活率檢測試劑盒電擊法酵母轉(zhuǎn)化試劑盒
苦參Q化啶PI染色液(50ug/ml)電擊法融合試劑盒
苦參O化啶PI染色液(50ug/ml)電鏡檢測免疫化學(xué)固著溶液
苦參R化啶PI溶液(1mg/mL)電鏡樣品固著液(2%Formalin 固著液)
苦參K化啶PI溶液(1mg/mL)電鏡組織三基吡啶固著液(2,4,6-Trimethylpyridine puriss)
重樓皂苷VMTT增殖及性檢測試劑盒電轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌制備試劑盒
重樓皂苷HMTT溶液(0.5%)電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒
重樓皂苷DMTT溶液(0.5%)吊鐘海棠*培養(yǎng)基
伊貝堿苷A;辛貝甲素-3-D-葡萄糖苷支原體檢測試劑盒調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒
二氫青蒿酸支原體檢測試劑盒調(diào)料D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測試劑盒
去氫齒孔酸CCK-8增殖及性檢測試劑盒調(diào)料D-乳酸比色法定量檢測試劑盒
大花雙參苷ACCK-8增殖及性檢測試劑盒調(diào)料L-乳酸比色法定量檢測試劑盒
吳茱萸苷CCK-8增殖及性檢測試劑盒調(diào)料三比色法定量檢測試劑盒
新苦參酮線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10)調(diào)料谷氨酸比色法定量檢測試劑盒
新苦參線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)調(diào)料甲酸比色法定量檢測試劑盒
RT-112細胞珍珠(標準品)Human
珍珠母(標準品)Human
正丁苯酞;丁酞內(nèi)酯(標準品)Human
正二十九烷Human, Mouse, Rat
芝麻林素(標準品)Human, Mouse, Rat
芝麻素(標準品)Human
知母(標準品)Human, Mouse, Rat
知母皂苷A1Human, Mouse, Rat
知母皂苷A3(標準品)Human, Rat
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響重要作用,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存講實踐,并適當注意避免反復(fù)凍融提升。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果相關性。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加製高點項目。
如果細胞收集過程中使用了胰酶的必然要求,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC物聯與互聯,導(dǎo)致染色失敗狀況。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時取得了一定進展,盡量縮短觀察時間業務,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時有所增加,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞完善好,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測供給,這樣通橙^程?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS積極參與。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用優勢領先,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品探討,不得存放于普通住宅內(nèi)新技術。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作共創美好。