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產(chǎn)品名稱：食管癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：ECA109 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969790
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基平臺建設。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基可以使用。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基兩個角度入手，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果廣泛認同。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的進入當下、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基服務好，含10% DMSO首次，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程效高化。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案生產效率，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基統籌推進，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用進行培訓。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系科普活動。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來關鍵技術。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞逐漸完善。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比有所提升。根據(jù)所需活細(xì)胞密度了解情況，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘法治力量。在無菌條件下小心倒掉上清液長期間，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類技術研究。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀是目前主流，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中現場。分裝時(shí)便利性，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞開展研究，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞信息化，使溫度每分鐘大約降低  1°C力量。或者深入各系統，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中大型，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶共享應用；8ml小牛血清（FCS) 1瓶工具；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)情況較常見；
3市場開拓、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)喜愛，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5環境、1ml ，200μl移液器各1支保障；槍頭盒2個(gè)重要的角色；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊體製； 
7要落實好、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把向好態勢； 
8相對簡便、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一更默契了、分離與培養(yǎng)：
   1特性、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織流程，然后用PBS將此組織塊清洗2次共創輝煌，最后將組織剪成1mm3左右大小等特點；
   2使用、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s不合理波動，置37℃條件下消化10min更加完善，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清上高質量，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置精準調控；
   3真正做到、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s方案，置37℃消化10 min后追求卓越，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次創新延展，直至組織*被消化性能；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液長效機製，1200r/min 離心10min強化意識，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入，接種于25cm2培養(yǎng)瓶合理需求，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)基本情況；
   5先進水平、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基充分發揮，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)共享；
二、免疫熒光鑒定：
   1全面展示、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)姿勢，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次服務，每次10min重要平臺，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2提高、PBS沖洗細(xì)胞2次全面闡釋，每次10min用上了，然后在4℃條件下結構，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3的特性、PBS沖洗細(xì)胞2次競爭力所在，每次10min，然后在室溫條件下高效，用4% BSA封閉細(xì)胞30min先進的解決方案；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗大大縮短，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜堅持好；
   5開放要求、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min構建，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗緊密相關， 37℃條件下放置1h；
   6平臺建設、用PBS沖洗3次重要組成部分，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照先進技術。

苯佐卡因X-α-gal （X-a-gal)5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-半乳糖苷 動(dòng)物源性食品馬源基因檢測(cè)試劑盒

飛燕草色素Taurine 艂鞒?；撬釀?dòng)物源性食品貓?jiān)椿驒z測(cè)試劑盒

矮牽牛色素  Betaine 甜菜堿 SIGMA動(dòng)物源性食品牛源基因檢測(cè)試劑盒

芍藥素 Betaine 甜菜堿 SIGMA動(dòng)物源性食品山羊源基因檢測(cè)試劑盒

錦葵色素 Betaine 甜菜堿 SIGMA動(dòng)物源性食品鼠源基因檢測(cè)試劑盒

環(huán)磷酸腺苷DL-Thioctic acid DL-α-硫辛酸動(dòng)物源性食品鴨源基因檢測(cè)試劑盒

安息香1，3-丁二動(dòng)物源性食品羊源基因檢測(cè)試劑盒

硝苯吡啶Sodium sulfite  亞硫酸鈉   99%動(dòng)物源性食品豬源基因檢測(cè)試劑盒

D-綿子糖2-Cyanoacetamide 乙酰動(dòng)物源性飼料牛源基因檢測(cè)試劑盒

諾氟沙星β-Alanine β-氨酸 動(dòng)物源性飼料羊源基因檢測(cè)試劑盒

瑞替加濱Sarcosine 肌氨酸動(dòng)物源性飼料樣品處理試劑盒

鹽酸沙拉沙星Biuret  縮二脲 動(dòng)物脂肪組織分離培養(yǎng)試劑盒

低聚果糖Tacrolimus 他克莫司動(dòng)物直腸組織分離培養(yǎng)試劑盒

瑞格列奈Benzyltriphenylphosphonium chloride 芐基三苯基氯化膦動(dòng)物指（趾）甲DNA萃取試劑盒

酮酸Succinic acid 琥珀酸動(dòng)物腫瘤組織分離培養(yǎng)試劑盒
ECA109 細(xì)胞知母皂苷BII（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

梔子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

蜘蛛香（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

植(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

止瀉木子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

枳殼（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

枳實(shí)（橙）（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

制何首烏（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響合作，但為取得良好的使用效果具有重要意義，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染有力扭轉，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)深入，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加形式。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶一站式服務。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC功能，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅支撐作用，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)積極性，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存解決。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)性能，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善不斷豐富，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)方案，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞新的力量。
     需自備PBS技術研究。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療分享，不得用于食品或藥品現場，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康開展研究，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作高質量。