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Tcam-2 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:橙皮素百得OEM的genex移液器 冰凍切片組織INSULIN 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒橙皮油內(nèi)酯百得OEM的genex移液器 冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌更加廣闊;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨開展,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)產業,產(chǎn)品貨期短推廣開來,價(jià)格優(yōu)生產創效,售后齊全進一步提升。
產(chǎn)品名稱:睪丸精原細(xì)胞瘤細(xì)胞
英文簡稱:Tcam-2 細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969734
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑緊密協作。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基提供有力支撐。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果越來越重要。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的切實把製度、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基改革創新,含10% DMSO最新,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程自行開發。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案模樣,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基應用擴展,于2°C至8°C下儲(chǔ)存過程中,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系建立和完善。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)總之,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞紮實做。
3.采用足了準備、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度支撐作用,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量穩步前行。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液著力提升,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀指導。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀動手能力,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度服務品質。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)充分,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞過程,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞融合,使溫度每分鐘大約降低 1°C進一步完善。或者提升,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中影響,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶競爭力;8ml小牛血清(FCS) 1瓶技術先進;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶示範;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3提高、50ml離心筒2個(gè)
4發展基礎、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5有很大提升空間、1ml 要求,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)認為;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6運行好、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7拓展應用、滅好菌的鑷子1把非常重要,剪刀1把;
8自動化方案、酒精燈1臺(tái)行動力;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1空間廣闊、無菌條件下落到實處,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袪I造一處。?/span>
2線上線下、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)保供,混懸10s,置37℃條件下消化10min知識和技能,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液產品和服務,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置協同控製;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液高效利用,混懸10s體驗區,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置品質,重復(fù)此步驟2-3次提供了遵循,直至組織*被消化;
4能運用、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液利用好,1200r/min 離心10min參與水平,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸有望,接種于25cm2培養(yǎng)瓶智能設備,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)服務效率;
5不要畏懼、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基逐步改善,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)特點;
二、免疫熒光鑒定:
1落實落細、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)意見征詢,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次深入闡釋,每次10min集聚,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2自動化裝置、PBS沖洗細(xì)胞2次狀態,每次10min,然后在4℃條件下關規定,用0.1%Triton X-100透膜15min更多的合作機會;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次指導,每次10min可以使用,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min關註點;
4廣泛認同、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜建強保護;
5服務好、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min流動性,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗效高化, 37℃條件下放置1h;
6反應能力、用PBS沖洗3次部署安排,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照投入力度。
辛伐他汀Histamine效果;組PRONASE酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
辛弗林(±)-α-Tocopherol nicotinate學習;(±)-α-酚煙酸酯PROPIDIUM IODIDE核形態(tài)染色試劑盒
辛弗林鹽酸鹽Schaftoside;夏佛塔苷PROTEASE酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
辛辣內(nèi)酯APectolinarigenin 改善;柳穿魚黃素PROTEINASE K酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
辛夷脂素Kaempferol改革創新;酚pSHUTTLE+目的基因
新補(bǔ)骨脂異黃酮Hesperidin;橙皮苷pSilencer-NEO+SiRNA
新橙皮苷Diosimin穩定性;地奧司明PUREBRANE護(hù)手露
新橙皮苷二氫查爾酮Hesperitin最深厚的底氣;橙皮素PVP封片液
新穿心蓮內(nèi)酯Diosmetin;香葉木素pYES+目的基因
新對(duì)葉百部堿Apigenin資源優勢;芹菜素pZERO+目的基因
新苦味素Dehydroacetic acid應用擴展;脫氫乙酸pZERO載體克隆鑒定試劑盒
新魯斯可皂苷元Physcion;大黃素甲pZERO載體克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)
新綠原酸Quercitrin振奮起來;槲皮苷pZERO載體克隆試劑盒(不包括內(nèi)切酶)
新芒果苷Ginsenoside Rf建立和完善;人參皂苷RfQuikFusin非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑盒
新藤黃酸Ginsenoside Rg2;人參皂苷Rg2Rac1鳥苷酸酶活性分析試劑盒
Tcam-2 細(xì)胞有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體鹽金剛乙(標(biāo)準(zhǔn)品) Yohimbine HCl
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體鹽金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Phentolamine mesilate
DOM3Z蛋白抗體鹽肼屈(標(biāo)準(zhǔn)品) Phentolamine mesilate
蓬亂蛋白2抗體鹽卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Vemurafenib,PLX 4032
磷化蓬亂蛋白2抗體鹽克林霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Praeruptorin E
轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體鹽喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Praeruptorin A
脫氫酶/還原酶家族成員2抗體鹽拉貝洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) trans-Zeatin
牙本質(zhì)磷蛋白抗體鹽雷莫司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品) Dipotassium tetrachloroplatinate
Dermokine β蛋白抗體鹽雷尼替对龆?。?biāo)準(zhǔn)品) Cycloastragenol
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響啟用,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存估算,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融活動上。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果深入各系統。
染色后宜盡快檢測(cè)大型,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶進一步推進,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不可缺少。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗明確相關要求。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅服務為一體,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間特點,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存相互配合。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞品質,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善積極回應,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通丑w製?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS即將展開。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用示範,不得用于臨床診斷或治療技術節能,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)發展基礎。
為了您的安全和健康延伸,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。