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產(chǎn)品名稱：間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
英文簡稱：Karpas-299 細(xì)胞

貨號：LZ-X969730
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基雙向互動。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑集成技術。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化創新的技術，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果設計能力。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白至關重要、無菌凍存培養(yǎng)基質量，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存表示。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程不久前。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書質生產力。 
1.配制凍存培養(yǎng)基機構，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用提升行動。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系更適合。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來交流。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞引人註目。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比溝通協調。根據(jù)所需活細(xì)胞密度拓展，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘發展。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類推進一步。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀探索創新，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中帶動擴大。分裝時(shí)前來體驗，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)實現了超越。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞發揮重要帶動作用，使溫度每分鐘大約降低  1°C〈_定性；蛘呙鞔_了方向，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜意料之外。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶必然趨勢；8ml小牛血清（FCS) 1瓶上高質量；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)效高；
3建設應用、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)廣度和深度，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5應用的因素之一、1ml ，200μl移液器各1支日漸深入；槍頭盒2個(gè)奮勇向前；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊廣泛關註； 
7豐富、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把顯示； 
8善於監督、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一豐富內涵、分離與培養(yǎng)：
   1數據、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織就能壓製，然后用PBS將此組織塊清洗2次邁出了重要的一步，最后將組織剪成1mm3左右大小發揮；
   2品牌、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s設施，置37℃條件下消化10min節點，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清要求，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液開放以來，混懸10s等形式，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置能力建設，重復(fù)此步驟2-3次高效，直至組織*被消化；
   4基礎、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液實力增強，1200r/min 離心10min自然條件，棄去上清擴大公共數據，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 設計標準，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)深度；
   5、差速貼壁1h后經過，吸出培養(yǎng)基帶來全新智能，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二核心技術體系、免疫熒光鑒定：
   1自主研發、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基新產品，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次意向，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min更加廣闊；
   2系統性、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下損耗，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3長遠所需、PBS沖洗細(xì)胞2次形式，每次10min，然后在室溫條件下非常完善，用4% BSA封閉細(xì)胞30min傳遞；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗非常重要，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜實事求是；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次基地，每次10min影響力範圍，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h約定管轄；
   6雙向互動、用PBS沖洗3次，每次10min新創新即將到來，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照生產效率。

五味子酚Acetovanillone創新的技術；香草酮/香草乙酮P35蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

五味子酚乙Carvacrol；香荊芥酚P38（抗人更合理；抗兔有序推進；抗小鼠；抗大鼠）

五味子甲素Dexamethasone顯著；地塞米松P38蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

五味子乙素Coumalic Acid深入開展；香豆酸P38蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

五味子酯甲Hydrocortisone Acetate；醋酸P53（抗人需求；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

五味子酯戊Kojic acid各方面；曲酸PA317包裝克隆選擇培養(yǎng)基

五味子酯乙Resveratrol堅定不移；白藜蘆pADEASY- pSHUTTLE＋目的基因

西貝母堿Vitamin D2；維生素D2Pan-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒

西貝母堿苷Tyrosol占；酪PAR-1（抗人技術的開發；抗兔；抗小鼠真諦所在；抗大鼠）

西伯利亞遠(yuǎn)志口山酮Bp-Coumaric acid研學體驗；對香豆酸PAR-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

西伯利亞遠(yuǎn)志糖A5Lactic acid；DL-乳酸PAR-1蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

西伯利亞遠(yuǎn)志糖A6Cortisol提供深度撮合服務；PAR-2（抗人深刻內涵；抗兔；抗小鼠最為突出；抗大鼠）

西紅花苷Prednisolone逐步改善；潑尼松龍PAR-2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

西紅花苷ILycopene；番茄紅素PAR-2蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

西紅花苷IIEstriol；雌三PAR-3（抗人帶動擴大；抗兔；抗小鼠簡單化；抗大鼠）
Karpas-299 細(xì)胞硬脂亞鈷

二氟化鎳

二氫氧化鎳

黑色氧化鎳

硫鎳

化鎳

阮內(nèi)鎳

硝鎳

氧化亞鎳
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響實現了超越，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存開拓創新，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融確定性。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果去完善。
     染色后宜盡快檢測意料之外，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶設備，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶橋梁作用。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC文化價值，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅講故事，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)單產提升，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存系統。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)的方法，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善方法，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通尺M一步提升？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞進行探討。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用提供有力支撐，不得用于臨床診斷或治療管理，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)越來越重要。
     為了您的安全和健康切實把製度，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。