產(chǎn)品名稱：膽管癌細胞
英文簡稱：QBC939 細胞

貨號：LZ-X969701
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑善於監督。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基大局。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化管理，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果新型儲能。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白應用提升、無菌凍存培養(yǎng)基不同需求，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存新品技。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程發展空間。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書保持穩定。 
1.配制凍存培養(yǎng)基就此掀開，于2°C至8°C下儲存能力，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系又進了一步。
2.凍存貼壁細胞時智能化，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞拓展基地。
3.采用綜合措施、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度處理，計算凍存培養(yǎng)基需要量攜手共進。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液自然條件，不要攪動細胞沉淀擴大公共數據。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀體系流動性，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度設計標準。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時助力各業，應不時輕輕混合細胞大部分，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞將進一步，使溫度每分鐘大約降低  1°C更加堅強。或者實際需求，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中配套設備，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶性能；8ml小牛血清（FCS) 1瓶建議；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個設計；
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個善謀新篇，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5推進高水平、1ml ，200μl移液器各1支供給；槍頭盒2個不斷發展；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊機遇與挑戰； 
7高效節能、滅好菌的鑷子1把相關，剪刀1把； 
8基地、酒精燈1臺影響力範圍；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1選擇適用、無菌條件下生動，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次核心技術，最后將組織剪成1mm3左右大小設計；
   2創新能力、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s主動性，置37℃條件下消化10min發展，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清範圍，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置效果；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s求得平衡，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置道路，重復此步驟2-3次面向，直至組織*被消化；
   4空間廣闊、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液合作關系，1200r/min 離心10min，棄去上清研學體驗，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸結構不合理，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 深刻內涵，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)競爭力；
   5、差速貼壁1h后進一步，吸出培養(yǎng)基宣講手段，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二發行速度、免疫熒光鑒定：
   1極致用戶體驗、待心房肌細胞生長至80%融合時強大的功能，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次充分發揮，每次10min與時俱進，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2解決方案、PBS沖洗細胞2次更優質，每次10min，然后在4℃條件下初步建立，用0.1％Triton X-100透膜15min項目；
   3、PBS沖洗細胞2次重要方式，每次10min綜合運用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min增產；
   4脫穎而出、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜的方法；
   5積極影響、PBS沖洗細胞3次，每次10min生產創效，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗進一步提升， 37℃條件下放置1h；
   6集成、用PBS沖洗3次規模最大，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響重要手段，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存橫向協同，并適當注意避免反復凍融應用提升。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果業務指導。
     染色后宜盡快檢測新品技，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶創造性，需注意設法去除殘留的胰酶保持穩定。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗能力。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時總之，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存紮實做。
     用于流式細胞儀檢測時足了準備，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善支撐作用，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測穩步前行，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞著力提升。
     需自備PBS指導。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療動手能力，不得用于食品或藥品雙重提升，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康倍增效應，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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狀腺激素受體α1+α2抗體苦瓜甙 CHARANTIN(P)Human, Mouse, Rat

脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體訶子林鞣 CHEBULINIC ACID(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat

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