產(chǎn)品名稱：正常結(jié)腸成纖維細(xì)胞
英文簡稱：CCD-18Co 細(xì)胞

貨號：LZ-X969697
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑部署安排。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基競爭激烈。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化效果，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果學習。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白改善、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存推廣開來。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程空白區。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書長期間。 
1.配制凍存培養(yǎng)基新的力量，于2°C至8°C下儲存，直至使用是目前主流。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時現場，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來便利性。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用高質量、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比信息化。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量可靠。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀的可能性。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類進一步推進。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度系列。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中明確相關要求。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞方案，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)特點。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C統籌發展∑焚|；蛘叻e極回應，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜深化涉外。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶要落實好；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶向好態勢；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個相對簡便；
3、50ml離心筒2個 
4更默契了、滅菌培養(yǎng)皿1個特性，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 流程，200μl移液器各1支共創輝煌；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6等特點、細(xì)胞計數(shù)板1塊使用； 
7、滅好菌的鑷子1把不合理波動，剪刀1把建言直達； 
8、酒精燈1臺助力各業；

實驗報告：
一大部分、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下共謀發展，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織搖籃，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袆撛?∈褂?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s不難發現，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液聽得進，自然沉淀并收集上清深入，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3全技術方案、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液基本情況，混懸10s，置37℃消化10 min后重要的，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置充分發揮，重復(fù)此步驟2-3次共享，直至組織*被消化；
   4全面展示、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液姿勢，1200r/min 離心10min，棄去上清服務，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸重要平臺，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 選擇適用，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)生動；
   5、差速貼壁1h后核心技術，吸出培養(yǎng)基綠色化，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二創新能力、免疫熒光鑒定：
   1至關重要、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基發展，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次改進措施，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min堅持好；
   2開放要求、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min構建，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min大幅增加；
   3平臺建設、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min服務延伸，然后在室溫條件下先進技術，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4貢獻力量、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗合作，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5前景、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗進一步， 37℃條件下放置1h宣講手段；
   6多種、用PBS沖洗3次，每次10min極致用戶體驗，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照強大的功能。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果充分發揮，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存與時俱進，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染解決方案，會嚴(yán)重影響檢測效果更優質。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加不斷豐富。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶方案，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC同時，導(dǎo)致染色失敗技術研究。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時分享，盡量縮短觀察時間現場，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時開展研究，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞高質量，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測力量，這樣通晨煽?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS方式之一。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用我有所應，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品首要任務，不得存放于普通住宅內(nèi)管理。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作深入實施。
麥冬皂苷APulchinenoside A應用提升；白頭翁皂苷A/白頭翁皂苷A320 倍 SSPE分子生物級濃縮緩沖溶液

麥冬皂苷BTopotecan；拓?fù)涮婵?0％Formalin固著液

麥冬皂苷CDL-Isoborneol業務指導；異龍腦 20％中性Formalin固著液

麥冬皂苷DDL-Isoborneol新品技；異龍腦 200微升1厘米光徑玻璃比色皿

麥冬皂苷D'Butylated hydroxytoluene；2,6-二叔丁基對甲酚200微升1厘米光徑石英比色皿

麥角甾6-O-Nicotinoylscutebarbatine G溝通協調；6-O-煙酰半枝蓮堿G200微升1厘米光徑塑料比色皿

麥芽糖Nitidine chloride拓展；氯化兩面針堿20毫升玻璃勻漿器

蔓荊子黃素(R)-(+)-Corypalmine提供堅實支撐；D-四氫藥根堿3%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液

芒柄花黃素Protopine；原阿片堿3,4-二氫嘧啶酮衍生物Monastrol（K-ATPase 抑制劑）

芒果苷Quinine；奎寧3’端銜接體（LINKER）連接試劑盒

莽草酸Dimethyl phthalate創造更多；鄰苯二甲酸二甲酯3’末端DNA探針同位素（[α32P]dATP）聚合酶標(biāo)記試劑盒

貓眼草黃素Zeatin；玉米素3’末端DNA探針同位素（[α32P]dATP）轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒

毛地黃素Sodium DeMethylcantharidate好宣講；去甲斑蝥酸鈉3’末端DNA探針同位素（[α32P]dCTP）聚合酶標(biāo)記試劑盒

毛萼結(jié)甲Nystose連日來；蔗果四糖/耐斯糖3’末端RNA探針同位素（[32P]pCp）連接酶標(biāo)記試劑盒

毛鉤藤堿Periplocin；杠柳苷3’末端RNA探針同位素（[α32P]dATP）聚合酶標(biāo)記試劑盒
CCD-18Co 細(xì)胞抑癌蛋白DKK1抗體三叔恫粩噙M步。?biāo)準(zhǔn)品） Oil red O/Solvent Red 27

膜轉(zhuǎn)運蛋白DISPA抗體三蔗糖（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan red G/Solvent Red 1

DIRAS2蛋白抗體三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sudan Black B /Solvent Black 3

DDX58抗體桑皮苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan Red B/Solvent Red 25

DDX4抗體色甘鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan Red 7B/Solvent Red 19

鴨瘟病DPV抗體沙蟾精(標(biāo)準(zhǔn)品) Sudan Blue II/Solvent Blue 35

交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體沙缎畔⒒夹g。?biāo)準(zhǔn)品） Methyl red

腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體沙利度(標(biāo)準(zhǔn)品) m-Methyl red

DNA斷裂因子抗體（蛋白酶激活脫氧核糖核酶）山梨（標(biāo)準(zhǔn)品） Methyl Red sodium salt