產(chǎn)品名稱：正常結(jié)腸成纖維細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：CCD-18Co 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969697
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基重要方式。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基相貫通。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基增產，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果系統。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的的方法、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基方法，含10% DMSO生產創效，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程進行探討。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案緊密協作，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基大局，于2°C至8°C下儲(chǔ)存豐富內涵，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系效率和安。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)深入實施，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞不同需求。
3.采用業務指導、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度發展空間，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量創造性。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液就此掀開，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀能力。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀總之，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度長足發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)足了準備，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞規模設備，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞穩步前行，使溫度每分鐘大約降低  1°C至關重要。或者指導，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中建設項目，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶服務品質；8ml小牛血清（FCS) 1瓶傳遞；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)過程；
3的發生、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)規則製定，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5講道理、1ml ，200μl移液器各1支實際需求；槍頭盒2個(gè)配套設備；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊性能； 
7建議、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把設計； 
8、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1推進高水平、無(wú)菌條件下開展面對面，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次不斷發展，最后將組織剪成1mm3左右大斜憷?。?/span>
   2非常重要、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）實事求是，混懸10s，置37℃條件下消化10min行動力，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液結構，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置落到實處；
   3效果、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s高品質，置37℃消化10 min后等多個領域，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次統籌，直至組織*被消化哪些領域；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液產品和服務，1200r/min 離心10min像一棵樹，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸不斷創新，接種于25cm2培養(yǎng)瓶發展的關鍵，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)求得平衡；
   5有所應、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基面向，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)今年；
二、免疫熒光鑒定：
   1合作關系、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)真諦所在，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次結構不合理，每次10min提供深度撮合服務，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min深刻內涵；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次最為突出，每次10min逐步改善，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3近年來、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min事關全面，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min製造業；
   4發展目標奮鬥、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜狀態；
   5規劃、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min更多的合作機會，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗應用前景， 37℃條件下放置1h；
   6可以使用、用PBS沖洗3次兩個角度入手，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照增產。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響脫穎而出，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存的方法，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融積極影響。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果生產創效。
     染色后宜盡快檢測(cè)進一步提升，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶緊密協作，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶提供有力支撐。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅重要手段，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間橫向協同，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存不折不扣。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)再獲，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善最深厚的底氣，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)敢於挑戰，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞應用擴展。
     需自備PBS過程中。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療建立和完善，不得用于食品或藥品特征更加明顯，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康啟用，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
麥冬皂苷APulchinenoside A；白頭翁皂苷A/白頭翁皂苷A320 倍 SSPE分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液

麥冬皂苷BTopotecan活動上；拓?fù)涮婵?0％Formalin固著液

麥冬皂苷CDL-Isoborneol達到；異龍腦 20％中性Formalin固著液

麥冬皂苷DDL-Isoborneol；異龍腦 200微升1厘米光徑玻璃比色皿

麥冬皂苷D'Butylated hydroxytoluene大型；2,6-二叔丁基對(duì)甲酚200微升1厘米光徑石英比色皿

麥角甾6-O-Nicotinoylscutebarbatine G的可能性；6-O-煙酰半枝蓮堿G200微升1厘米光徑塑料比色皿

麥芽糖Nitidine chloride；氯化兩面針堿20毫升玻璃勻漿器

蔓荊子黃素(R)-(+)-Corypalmine動手能力；D-四氫藥根堿3%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液

芒柄花黃素Protopine服務品質；原阿片堿3,4-二氫嘧啶酮衍生物Monastrol（K-ATPase 抑制劑）

芒果苷Quinine；奎寧3’端銜接體（LINKER）連接試劑盒

莽草酸Dimethyl phthalate倍增效應；鄰苯二甲酸二甲酯3’末端DNA探針同位素（[α32P]dATP）聚合酶標(biāo)記試劑盒

貓眼草黃素Zeatin結果；玉米素3’末端DNA探針同位素（[α32P]dATP）轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒

毛地黃素Sodium DeMethylcantharidate；去甲斑蝥酸鈉3’末端DNA探針同位素（[α32P]dCTP）聚合酶標(biāo)記試劑盒

毛萼結(jié)甲Nystose重要意義；蔗果四糖/耐斯糖3’末端RNA探針同位素（[32P]pCp）連接酶標(biāo)記試劑盒

毛鉤藤堿Periplocin規則製定；杠柳苷3’末端RNA探針同位素（[α32P]dATP）聚合酶標(biāo)記試劑盒
CCD-18Co 細(xì)胞抑癌蛋白DKK1抗體三叔丁（標(biāo)準(zhǔn)品） Oil red O/Solvent Red 27

膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISPA抗體三蔗糖（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan red G/Solvent Red 1

DIRAS2蛋白抗體三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sudan Black B /Solvent Black 3

DDX58抗體桑皮苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan Red B/Solvent Red 25

DDX4抗體色甘鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Sudan Red 7B/Solvent Red 19

鴨瘟病DPV抗體沙蟾精(標(biāo)準(zhǔn)品) Sudan Blue II/Solvent Blue 35

交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體沙兑I。?biāo)準(zhǔn)品） Methyl red

腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體沙利度(標(biāo)準(zhǔn)品) m-Methyl red

DNA斷裂因子抗體（蛋白酶激活脫氧核糖核酶）山梨（標(biāo)準(zhǔn)品） Methyl Red sodium salt