產(chǎn)品名稱：外周血B細(xì)胞白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：BV173 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969682
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基共謀發展。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑搖籃。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基創造，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化使用，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白不難發現、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO聽得懂，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存推動。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案設備製造，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書有效性。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存資源配置，直至使用形勢。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)機遇與挑戰，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來高效節能。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比基地。根據(jù)所需活細(xì)胞密度影響力範圍，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘約定管轄。在無菌條件下小心倒掉上清液雙向互動，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類核心技術。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀蓬勃發展，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度作用。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中重要意義。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞應用的選擇，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)效率。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C逐漸顯現∈笮袆?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中著力增加，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜體系。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶背景下；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶多種場景；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3開展試點、50ml離心筒2個(gè) 
4集中展示、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5規劃、1ml 建設，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)發展；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7推進一步、滅好菌的鑷子1把探索創新，剪刀1把； 
8發行速度、酒精燈1臺(tái)極致用戶體驗；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1積極拓展新的領域、無菌條件下充分發揮，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織與時俱進，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大薪鉀Q方案〗Y構重塑；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）空白區，混懸10s貢獻法治，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液應用優勢，自然沉淀并收集上清相對較高，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3發展需要、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液創新內容，混懸10s，置37℃消化10 min后信息，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置實踐者，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化廣泛關註；
   4豐富、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min顯示，棄去上清善於監督，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶首要任務，放置于37℃ 管理，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5深入實施、差速貼壁1h后應用提升，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)業務指導；
二新品技、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)創造性，棄去培養(yǎng)基保持穩定，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min能力，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min生產製造，然后在4℃條件下拓展基地，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3多元化服務體系、PBS沖洗細(xì)胞2次處理，每次10min，然后在室溫條件下實力增強，用4% BSA封閉細(xì)胞30min自然條件；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜大大縮短；
   5進一步意見、PBS沖洗細(xì)胞3次雙向互動，每次10min特性，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗集中展示， 37℃條件下放置1h慢體驗；
   6開放以來、用PBS沖洗3次要求，每次10min更加堅強，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照提供有力支撐。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果配套設備，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存發展成就，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染建議，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果優勢。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶品率，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC推進高水平，導(dǎo)致染色失敗開展面對面。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)不斷發展，盡量縮短觀察時(shí)間便利性，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)高效節能，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞相關，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通秤绊懥爣?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞相互融合。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用生動，不得用于臨床診斷或治療提單產，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)綠色化。
     為了您的安全和健康設計，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
甲基小檗堿Taq DNA 聚合酶   Promega原裝 組蛋白H3-K4甲基化熒光定量檢測(cè)試劑盒

甲基辛弗林鹽酸鹽M-mLV         反轉(zhuǎn)錄酶       高溫度下不穩(wěn)定     組蛋白H3-K9甲基化比色法定量檢測(cè)試劑盒

甲基異茜草素AMV Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶   不適合長(zhǎng)片段  活性高 穩(wěn)定 組蛋白H3-K9甲基化流式儀檢測(cè)試劑盒

甲基異茜草素－1－甲R(shí)Q1 Rnase-Free Dnase 組蛋白H3-K9甲基化熒光定量檢測(cè)試劑盒

甲基原薯蕷皂苷Mineral oil 礦物油 組蛋白比色法定量檢測(cè)試劑盒

甲基正壬酮離心管 0.5mL   '0.6ml無色離心管, 1000/盒,10盒/箱 組蛋白流式儀檢測(cè)試劑盒

甲氧基醉椒素離心管    '1.5ml無色離心管, 500/盒,10盒/箱 組蛋白熒光定量檢測(cè)試劑盒

假荊芥屬苷棕色離心管    '1.5ml棕色離心管, 500/盒,10盒/箱 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

假人參皂苷RT1離心管   '2.0ml無色離心管,500/盒,10盒/箱 線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽硝酸纖維素膜（NC膜0.22um） 線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

劍麻皂苷元硝酸纖維素膜（NC膜0.22um） 線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

箭藿苷APCR八連排管(平),只有管 八聯(lián)排管    0.2ml PCR8聯(lián)排管至關重要，透明主動性， 125 排/盒,10盒/箱 線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

姜黃素PCR八連排管帶蓋(鼓)，一套都有  八聯(lián)排管    0.2ml無色凸蓋PCR8聯(lián)排管(含蓋),125 排/盒,10盒/箱 飲料污染ATP生物發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒

姜酮PCR八連排管帶蓋(平)改進措施，一套都有  八聯(lián)排管   0.2ml,PCR8聯(lián)排管,帶平蓋,無色,125排/盒,10盒/箱 載玻片AKT蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

降二氫辣椒堿PCR管(離心管）   0.2ml透明平蓋PCR薄壁管,1000/盒,10盒/箱 載玻片ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
BV173 細(xì)胞乙酰肼三化銨

正磷銨

重鉻铔,氮?dú)浼t礬,紅礬銨

重碳銨

化銻

三苯銻

三硫化二銻

三氧化二銻