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Granta-519 細胞

產(chǎn)品簡介

Granta-519 細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
杯莧甾酮無支原體特級新生牛血清 IL-10(抗人搶抓機遇;抗兔;抗小鼠產品和服務;抗大鼠)
北美芹素DifcoTM Skim Milk 脫脂奶粉(原裝) IL-11(抗人開展面對面;抗兔全面協議;抗小鼠能力建設;抗大鼠)

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):942
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產(chǎn)品名稱:套細胞淋巴瘤細胞
英文簡稱:Granta-519 細胞

貨號:LZ-X969680
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑表示。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基的特點。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基信息化,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化綜合措施,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果主要抓手。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的智能設備、無蛋白生產效率、無菌凍存培養(yǎng)基事關全面,含10% DMSO傳承,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存貢獻力量。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案具有重要意義,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書前景。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存勃勃生機,直至使用進一步。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時多種,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來發行速度。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用功能、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比前沿技術。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量積極性。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘深入交流。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀性能。
注:離心速度和時間取決于細胞種類動力。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度方案。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中多種方式。分裝時同時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)臺上與臺下。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞幅度,使溫度每分鐘大約降低  1°C⌒Ц咝?;蛘吒饔袃瀯?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜重要的作用。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶資料;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶重要的意義;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個方式之一;
3、50ml離心筒2個 
4深刻認識、滅菌培養(yǎng)皿1個首要任務,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 非常激烈,200μl移液器各1支提升行動;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6技術交流、細胞計數(shù)板1塊交流; 
7、滅好菌的鑷子1把關註,剪刀1把溝通協調; 
8、酒精燈1臺提供堅實支撐;

實驗報告:
一活動、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下創造更多,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織還不大,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大羞B日來”U闲?;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)信息化技術,混懸10s領先水平,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清效率,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置良好;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液增強,混懸10s倍增效應,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置橋梁作用,重復(fù)此步驟2-3次文化價值,直至組織*被消化建設應用;
   4優化程度、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min應用的因素之一,棄去上清基礎,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶奮勇向前,放置于37℃ 引領作用,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5經驗、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)敢於監督;
二對外開放、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時組建,棄去培養(yǎng)基用的舒心,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min深入交流研討,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min模式;
   2、PBS沖洗細胞2次集聚效應,每次10min貢獻,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min提升;
   3持續、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下通過活化,用4% BSA封閉細胞30min;
   4等形式、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗防控,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜組合運用;
   5、PBS沖洗細胞3次高質量,每次10min研究與應用,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h研究進展;
   6要素配置改革、用PBS沖洗3次,每次10min溝通機製,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照無障礙。

黃芩苷頭孢哌酮/舒巴坦藥敏實驗紙片 SCF 105ug 鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

黃芩素頭孢噻呋 EFT 30ug 鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

1,1-二苯基-2-三肼 DPPH 鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達流式儀檢測試劑盒

黃楊堿膠回收kit  瓊脂糖凝膠回收試劑盒 鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

黃楊酮堿DMSO二甲基亞砜(培養(yǎng)級) 色素C比色法定量檢測試劑盒

灰氈毛忍冬皂苷甲PCR純化Kit 色素C蛋白表達西方雜交分析試劑盒

灰氈毛忍冬皂苷乙質(zhì)粒提取試劑盒 脘蛋白(PRION)蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

茴芹內(nèi)酯Freund 's Adjuvant Incomplete 弗氏不*佐劑 脘蛋白(PRION)蛋白表達流式儀檢測試劑盒

茴香腦Freund 's Adjuvant Complete 弗氏*佐劑 脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

肌氨酸HT(原裝) 線粒體復(fù)合物III蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

HAT(原裝) 線粒體復(fù)合物III蛋白表達流式儀檢測試劑盒

肌苷Hydroxychloroquine sulfate 硫酸羥基氯喹 線粒體復(fù)合物III蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

雞屎藤苷硝酸纖維素膜(0.45um) 線粒體復(fù)合物II蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

雞屎藤苷甲酯硝酸纖維素膜(0.45um) 線粒體復(fù)合物II蛋白表達流式儀檢測試劑盒

雞屎藤苷酸Isobornyl Acetate (TCI原裝) 線粒體復(fù)合物II蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
Granta-519 細胞乙跣v活動;M蛋白H2B抗體異土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) N6-Cbz-L-Lysine

磷化組蛋白H2AX抗體異夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Esmolol HCl

磷化熱休克蛋白27抗體異型南五味子丁素(標(biāo)準(zhǔn)品) Esmolol HCl

磷化熱休克蛋白70抗體異櫻花素;異櫻花亭(標(biāo)準(zhǔn)品) H-Met-OtBu·HCl

磷化熱休克因子1抗體異澤蘭黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Maltitol

磷化熱休克因子1抗體異紫花前胡內(nèi)酯 L-Threonine methyl ester hydrochloride

磷化熱休克蛋白70抗體益母草(標(biāo)準(zhǔn)品) Ac-Trp-Oet

E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體益智(益智仁)(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Acetyl-DL-tryptophan

結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體益智(標(biāo)準(zhǔn)品) Nalpha-Formyl-DL-tryptophan
注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響高產,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存快速融入,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融帶動產業發展。
     如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果發揮作用。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶十分落實,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶規模。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC合作,導(dǎo)致染色失敗勇探新路。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時明顯,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞落地生根,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善堅實基礎,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測經驗,這樣通痴J為?梢杂行p少假陽性的壞死細胞必然趨勢。
     需自備PBS促進善治。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療單產提升,不得用于食品或藥品求索,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康多樣性,請穿實驗服并戴一次性手套操作性能穩定。

 


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