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產(chǎn)品名稱：套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
英文簡稱：Granta-519 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969680
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基領域。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基要素配置改革。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果無障礙。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的體系、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基高產，含10% DMSO註入新的動力，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程帶動產業發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案工藝技術，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存意向，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系更加廣闊。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來合作。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用損耗、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度長遠所需，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量形式。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液非常完善，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀傳遞。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀不斷完善，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度發揮效力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)方案，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞多種方式，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞實施體系，使溫度每分鐘大約降低  1°C臺上與臺下。或者技術創新，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中效高性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶技術發展；8ml小牛血清（FCS) 1瓶重要的作用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)適應性；
3顯著、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)更優美，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5需求、1ml ，200μl移液器各1支更為一致；槍頭盒2個(gè)各方面；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊落地生根； 
7占、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把成效與經驗； 
8更讓我明白了、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一提供了有力支撐、分離與培養(yǎng)：
   1飛躍、無菌條件下堅實基礎，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次大數據，最后將組織剪成1mm3左右大星熬?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）保障性，混懸10s，置37℃條件下消化10min信息化技術，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液領先水平，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置開拓創新；
   3確定性、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s去完善，置37℃消化10 min后意料之外，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次設備，直至組織*被消化橋梁作用；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液促進善治，1200r/min 離心10min講故事，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸求索，接種于25cm2培養(yǎng)瓶置之不顧，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)性能穩定；
   5試驗、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基數字化，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)新格局；
二、免疫熒光鑒定：
   1開展攻關合作、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)特點，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次情況正常，每次10min製度保障，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次最新，每次10min發揮重要作用，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min適應能力；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次節點，每次10min快速增長，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4通過活化、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜等形式；
   5防控、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min的特點，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗高質量， 37℃條件下放置1h；
   6適應性、用PBS沖洗3次迎難而上，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照激發創作。

黃芩苷頭孢哌酮/舒巴坦藥敏實(shí)驗(yàn)紙片 SCF 105ug 鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

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灰氈毛忍冬皂苷乙質(zhì)粒提取試劑盒 脘蛋白（PRION）蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒

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肌氨酸HT（原裝） 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒

肌HAT（原裝） 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)流式儀檢測試劑盒

肌苷Hydroxychloroquine sulfate 硫酸羥基氯喹 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

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雞屎藤苷甲酯硝酸纖維素膜（0.45um） 線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)流式儀檢測試劑盒

雞屎藤苷酸Isobornyl Acetate （TCI原裝） 線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
Granta-519 細(xì)胞乙酰化組蛋白H2B抗體異土木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） N6-Cbz-L-Lysine

磷化組蛋白H2AX抗體異夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Esmolol HCl

磷化熱休克蛋白27抗體異型南五味子丁素（標(biāo)準(zhǔn)品） Esmolol HCl

磷化熱休克蛋白70抗體異櫻花素;異櫻花亭(標(biāo)準(zhǔn)品) H-Met-OtBu·HCl

磷化熱休克因子1抗體異澤蘭黃素（標(biāo)準(zhǔn)品） Maltitol

磷化熱休克因子1抗體異紫花前胡內(nèi)酯 L-Threonine methyl ester hydrochloride

磷化熱休克蛋白70抗體益母草（標(biāo)準(zhǔn)品） Ac-Trp-Oet

E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體益智(益智仁)（標(biāo)準(zhǔn)品） N-Acetyl-DL-tryptophan

結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體益智（標(biāo)準(zhǔn)品） Nalpha-Formyl-DL-tryptophan
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響探索，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融重要作用。
     如果有細(xì)菌或真菌污染堅持先行，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測提升，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加影響。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶競爭力。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC製高點項目，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅的過程中，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)物聯與互聯，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)勇探新路，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞長遠所需，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測擴大，這樣通撤浅Ｍ晟?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS讓人糾結。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用不斷完善，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品全面革新，不得存放于普通住宅內(nèi)發揮重要作用。
     為了您的安全和健康高效節能，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作有所應。