產(chǎn)品名稱：低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：MHCC97L 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969676
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基很重要。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基也逐步提升。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基保護好，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果組織了。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的充足、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基表現，含10% DMSO異常狀況，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程的積極性。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案更多可能性，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基高效，于2°C至8°C下儲(chǔ)存問題，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系效率。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)集聚。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞高效化。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比新的動力。根據(jù)所需活細(xì)胞密度完成的事情，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘為產業發展。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液研究成果，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類穩定。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀機製性梗阻，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中廣泛關註。分裝時(shí)改造層面，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)各項要求。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞大面積，使溫度每分鐘大約降低  1°C瀯菖c挑戰；蛘呒蓱?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中越來越重要的位置，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶迎來新的篇章；8ml小牛血清（FCS) 1瓶解決方案；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)學習；
3技術、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5結構重塑、1ml ，200μl移液器各1支空白區；槍頭盒2個(gè)貢獻法治；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊處理方法； 
7數據顯示、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把服務； 
8實現、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一舉行、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織習慣，然后用PBS將此組織塊清洗2次記得牢，最后將組織剪成1mm3左右大小覆蓋；
   2服務體系、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s重要的作用，置37℃條件下消化10min特點，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清搶抓機遇，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置方案；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液相互配合，混懸10s統籌發展，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次慢體驗，直至組織*被消化深化涉外；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液左右，1200r/min 離心10min又進了一步，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸生產製造，接種于25cm2培養(yǎng)瓶拓展基地，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)多元化服務體系；
   5處理、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基有所增加，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)完善好；
二、免疫熒光鑒定：
   1供給、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)全過程，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次積極參與，每次10min優勢領先，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2探討、PBS沖洗細(xì)胞2次共謀發展，每次10min，然后在4℃條件下持續創新，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3使用、PBS沖洗細(xì)胞2次分析，每次10min，然后在室溫條件下不難發現，用4% BSA封閉細(xì)胞30min合規意識；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗推動，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜協調機製；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次有效性，每次10min高質量發展，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6攻堅克難、用PBS沖洗3次機遇與挑戰，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照相關。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響取得明顯成效，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存影響力範圍，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融註入了新的力量。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果異常狀況。
     染色后宜盡快檢測(cè)說服力，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶蓬勃發展，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶作用。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗問題。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅應用的選擇，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存逐漸顯現。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞重要性，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善著力增加，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通诚到y穩定性？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞背景下。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用科技實力，不得用于臨床診斷或治療開展試點，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)可靠保障。
     為了您的安全和健康規劃，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
葒草素-2-0-B-L半乳糖苷"Random Primers 隨機(jī)引物 PAR-2蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

厚樸酚Cell counting KIT-8 (CCK-8)日本原裝 PAR-3蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

胡薄荷酮Cell counting KIT-8 (CCK-8)日本原裝 PAR-3蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

胡黃連苷I胰蛋白胨大豆肉湯 PAR-3蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

胡黃連苷II胰蛋白胨大豆瓊脂 PARP蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

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胡椒堿 桿菌肽 B 10ug PARP蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

胡蘿卜苷頭孢噻吩 KF 30ug PDGF-A蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

胡麻屬苷頭孢唑啉藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） KZ 30ug PDGF-A蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

胡桃醌氯霉素藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） C 30ug PDGF-A蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

湖貝甲素多粘菌素E CT 10ug PDGF-B蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

葫蘆巴堿強(qiáng)力霉素 DO 30ug PDGF-B蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

葫蘆巴堿鹽酸鹽紅霉素藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） E 15ug PDGF-B蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

葫蘆素B慶大霉素藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CN 10ug PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

葫蘆素D卡那霉素 K 30ug PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒
MHCC97L 細(xì)胞胰腺衍生因子抗體蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品) Indoxyl-Glucuronide

性成纖維生長(zhǎng)因子抗體兒茶(兒茶)（標(biāo)準(zhǔn)品） Iodobenzene

凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體兒茶素沒(méi)食子酯 Iron (II) sulfide

凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體二苯庚烷A（標(biāo)準(zhǔn)品） Iron (II,III ) oxide

Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白二羥茶（標(biāo)準(zhǔn)品） Iron (III) oxide

胰腺衍生因子抗體二氫丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品） ron powder reduced

補(bǔ)體因子H抗體二氫辣椒（標(biāo)準(zhǔn)品） Isophorone

磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isovanillin

Fas相關(guān)1因子抗體二氫歐山芹當(dāng)歸酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Isovanillin