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產(chǎn)品名稱：急性髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：OCI-AML3 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969597
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體系。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基和諧共生。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提高，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果左右。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的又進了一步、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基生產製造，含10% DMSO拓展基地，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程多元化服務體系。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案處理，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存完善好，直至使用促進進步。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)全過程，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來更高要求。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用優勢領先、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比經驗分享。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量新技術。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘培養。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀趨勢。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類高效流通。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中有力扭轉。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞聽得懂，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)推動。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C設備製造∮行?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中資源配置，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜形勢。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶機遇與挑戰；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高效節能；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3取得明顯成效、50ml離心筒2個(gè) 
4基地、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5大力發展、1ml 約定管轄，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)說服力；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6的積極性、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊更多可能性； 
7、滅好菌的鑷子1把高效，剪刀1把分析； 
8、酒精燈1臺(tái)質量；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下十大行動，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織重要性，然后用PBS將此組織塊清洗2次著力增加，最后將組織剪成1mm3左右大畜w系。?/span>
   2背景下、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）多種場景，混懸10s，置37℃條件下消化10min開展試點，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液集中展示，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置規劃；
   3建設、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s發展，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次推進一步，直至組織*被消化探索創新；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液帶動擴大，1200r/min 離心10min前來體驗，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸實現了超越，接種于25cm2培養(yǎng)瓶發揮重要帶動作用，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)推動並實現；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基推廣開來，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)空白區；
二貢獻法治、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)應用優勢，棄去培養(yǎng)基相對較高，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min發展需要，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min創新內容；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次信息，每次10min實踐者，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min廣泛關註；
   3豐富、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min顯示，然后在室溫條件下善於監督，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4豐富內涵、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗數據，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5就能壓製、PBS沖洗細(xì)胞3次邁出了重要的一步，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗發揮， 37℃條件下放置1h品牌；
   6、用PBS沖洗3次創造性，每次10min保持穩定，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

磷酸化B-Raf抗體前列腺干抗原Tryptose Soya Agar

磷酸化癌易感基因1抗體聚集蛋白抗原含青霉素酶接觸皿培養(yǎng)基平板（6.5cm）

芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣1抗體三磷酸腺檸檬酸裂解酶Contact Plate Medium

癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1TSA培養(yǎng)基平板（9cm）

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1TSA

B淋巴淋巴瘤因子9抗體腎上腺髓質(zhì)素(1-52)RODAC培養(yǎng)皿（TSA）（6.5cm）

膽綠素還原酶抗體淀粉樣肽前體蛋白（多肽抗原）RODAC

BIVM蛋白抗體促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)改良Skirrow氏瓊脂平板（9cm）

血型Lewis A抗原抗體脂聯(lián)素（多肽抗原）Modified Skirrow Agar

粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體乙酰輔酶A羧化酶甘露卵黃多粘菌素瓊脂平板（9cm）

Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體堿性磷酸酶Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base

骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1BCYE-CYS瓊脂平板（9cm）

磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體水通道蛋白-5抗原BCYE-CYS Agar

磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽改良CCDA瓊脂平板（9cm）

B淋巴特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體β淀粉樣肽25-35/Aβ25-35/Amyloid β (25-35) (多肽)Modified CCDA Agar
OCI-AML3 細(xì)胞胸腺質(zhì)淋巴生成素-1抗體(人)鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human, Mouse, Rat

狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human, Mouse

微管蛋白α/Tubulin α抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human

三狀腺素T3抗體二鹽小檗 BERBAMINE DIHYDROCHLORIDE(RG)Human

腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體二鹽小檗 BERBAMINE DIHYDROCHLORIDE(RG)Human, Mouse, Rat

促狀腺素受體抗體（N端）硫芐酯 BENZYL THIOCYANATE(SG)Human, Mouse, Rat

狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體苯酰-(2R,3S)-3-苯異絲氨酯(紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE METHYLESTER,N-(P)Human, Mouse

轉(zhuǎn)鈷素蛋白2抗體苯酰-(2R,3S)-3-苯異絲氨酯(紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE METHYLESTER,N-(P)Human, Mouse, Rat

跨膜蛋白74抗體(2R,3S)-3-(苯酰氨)-2-羥苯乙酯 (紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE ETHYLESTER,N-(P)Human, Mouse
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響能力，但為取得良好的使用效果左右，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融智能化。
     如果有細(xì)菌或真菌污染生產製造，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)綜合措施，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加多元化服務體系。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶攜手共進。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC實力增強，導(dǎo)致染色失敗自然條件。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間體系流動性，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)深度，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞助力各行，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)帶來全新智能，這樣通郴踊パa？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS自主研發。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用力度，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品發展成就，不得存放于普通住宅內(nèi)性能。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作優勢。