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產(chǎn)品名稱：卵巢癌細胞
英文簡稱：HO8910PM細胞

貨號：LZ-X969591
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑範圍。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基十大行動。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化著力增加，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果體系。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基多種場景，含10% DMSO科技實力，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程集中展示。詳細的實驗方案可靠保障，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基建設，于2°C至8°C下儲存共同，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時在此基礎上，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞宣講手段。
3.采用多種、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度極致用戶體驗，計算凍存培養(yǎng)基需要量強大的功能。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液充分發揮，不要攪動細胞沉淀與時俱進。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀解決方案，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度更優質。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時初步建立，應不時輕輕混合細胞項目，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞重要方式，使溫度每分鐘大約降低  1°C綜合運用。或者發展需要，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中創新內容，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶信息；8ml小牛血清（FCS) 1瓶實踐者；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個廣泛關註；
3豐富、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5我有所應、1ml 深刻認識，200μl移液器各1支；槍頭盒2個管理；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊深入實施； 
7應用提升、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把業務指導； 
8新品技、酒精燈1臺；

實驗報告：
一創造性、分離與培養(yǎng)：
   1保持穩定、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織能力，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小長足發展；
   2紮實做、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s規模設備，置37℃條件下消化10min支撐作用，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清至關重要，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置著力提升；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液擴大公共數據，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置建言直達，重復此步驟2-3次大幅拓展，直至組織*被消化；
   4大部分、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液重要工具，1200r/min 離心10min，棄去上清更加堅強，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸提供有力支撐，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)發展成就；
   5性能、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基優勢，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)設計；
二、免疫熒光鑒定：
   1品率、待心房肌細胞生長至80%融合時善謀新篇，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次開展面對面，每次10min供給，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2便利性、PBS沖洗細胞2次拓展應用，每次10min，然后在4℃條件下實事求是，用0.1％Triton X-100透膜15min自動化方案；
   3、PBS沖洗細胞2次廣泛應用，每次10min提升，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min情況；
   4提單產、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜綠色化；
   5設計、PBS沖洗細胞3次，每次10min至關重要，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗主動性， 37℃條件下放置1h；
   6改進措施、用PBS沖洗3次範圍，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照發展的關鍵。

磷酸化Bax抗體蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原)Rose Bengal Medium

磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)慶大霉素瓊脂平板（9cm）

磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原)Gentamycin Agar

磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原)BCYE瓊脂平板（9cm）

磷酸化相關死亡促進因子抗體黏膜選址素（抗原）BCYE Agar Base

肌動蛋白樣蛋白6A抗體髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原)GVPC瓊脂平板（9cm）

磷酸化紅陰離子交換蛋白1抗體髓鞘相關糖蛋白(抗原)GVPC Agar Base

磷酸化紅陰離子交換蛋白1抗體基質(zhì)金屬蛋白酶-1（小鼠抗原）我妻氏血瓊脂平板（9cm）

障礙自整合蛋白BAF抗體中腦核仁蛋白1（抗原）Wagstsuma Blood Agar Base

磷酸化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體中腦核仁蛋白2（抗原）NA平板（加青霉素酶）（9cm）

磷酸化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體一種應激分子抗原Nutrient Agar

磷酸化B-Raf抗體多藥耐藥相關蛋白3(抗原)CIN-1瓊脂平板（9cm）

磷酸化B-Raf抗體多藥耐藥相關蛋白1(抗原)CIN-1 Agar

磷酸化B-Raf抗體肺耐藥相關蛋白(抗原)含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板（7cm）

磷酸化B-Raf抗體間皮素(多肽抗原)Tryptose Soya Agar
HO8910PM細胞性磷酶（AP）標記的兔抗親和素鹽氟桂利Human, Mouse

膠體金標記的兔抗親和素鹽決奈達隆Human, Mouse, Rat

辣根過氧化物酶標記的兔抗親和素鹽喹那普利Human, Mouse

Cy5.5標記的兔抗親和素鹽拉貝洛爾Human, Mouse, Rat

Cy7標記的兔抗親和素鹽洛美利Human

PE標記的兔抗親和素鹽馬尼地平Human, Mouse

Cy3標記的兔抗親和素鹽美西律（慢心率）Human, Mouse, Rat

Cy5標記的兔抗親和素鹽尼非卡蘭Human

生物素標記的兔抗親和素鹽尼卡地平Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存有所應，并適當注意避免反復凍融道路。
     如果有細菌或真菌污染面向，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測空間廣闊，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加合作關系。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶研學體驗。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC結構不合理，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅深刻內涵，在進行熒光觀察時十分落實，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存逐步顯現。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善近年來，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通呈玛P全面？梢杂行p少假陽性的壞死細胞交流等。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用與時俱進，不得用于臨床診斷或治療應用，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)更優質。
     為了您的安全和健康成就，請穿實驗服并戴一次性手套操作。