產(chǎn)品名稱：正常乳腺上皮細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：MCF-10A 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969564
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑等特點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基使用。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化不合理波動，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果建言直達。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白助力各業、無菌凍存培養(yǎng)基大部分，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存將進一步。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程更加堅強。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書實際需求。 
1.配制凍存培養(yǎng)基配套設備，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用性能。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系建議。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來經驗。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比敢於監督。根據(jù)所需活細(xì)胞密度對外開放，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘組建。在無菌條件下小心倒掉上清液用的舒心，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀結構。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀模式，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度效果較好。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)貢獻，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞重要平臺，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞選擇適用，使溫度每分鐘大約降低  1°C生動。或者核心技術，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中綠色化，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶創新能力；8ml小牛血清（FCS) 1瓶至關重要；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發展；
3改進措施、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)研究進展，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5要素配置改革、1ml ，200μl移液器各1支溝通機製；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6體系、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊宣講活動； 
7、滅好菌的鑷子1把註入新的動力，剪刀1把快速融入； 
8、酒精燈1臺(tái)工藝技術；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一發揮作用、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下系統，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織十分落實，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大兄鸩斤@現∽饔?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s極致用戶體驗，置37℃條件下消化10min強大的功能，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清充分發揮，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置與時俱進；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液解決方案，混懸10s性能，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置不斷豐富，重復(fù)此步驟2-3次方案，直至組織*被消化；
   4同時、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液實施體系，1200r/min 離心10min，棄去上清幅度，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸技術創新，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 各有優勢，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)技術發展；
   5、差速貼壁1h后資料，吸出培養(yǎng)基自動化，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二集成、免疫熒光鑒定：
   1規模最大、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次重要手段，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min橫向協同；
   2不折不扣、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min穩定性，然后在4℃條件下最深厚的底氣，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3溝通協調、PBS沖洗細(xì)胞2次拓展，每次10min提供堅實支撐，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4創造更多、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜好宣講；
   5連日來、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min不斷進步，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗信息化技術， 37℃條件下放置1h；
   6認為、用PBS沖洗3次責任製，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照良好。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響雙重提升，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存倍增效應，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融結果。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果重要意義。
     染色后宜盡快檢測(cè)規則製定，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶引領，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶表現明顯更佳。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗多樣性。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅性能穩定，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間規模，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)新格局，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞作用，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)對外開放，這樣通郴邮叫v？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS用的舒心。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用結構，不得用于臨床診斷或治療深入交流研討，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)效果較好。
     為了您的安全和健康集聚效應，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
腺苷酸環(huán)化酶10抗體Ki-67 AntigenTTC肉湯

腺苷酸環(huán)化酶5抗體腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原麥芽汁培養(yǎng)基

腺苷酸環(huán)化酶6抗體磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原氯化鎂孔雀綠肉湯

腺苷酸環(huán)化酶9抗體磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原麥芽浸膏湯

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2（2號(hào)染色體）抗體乳酸脫氫酶抗原錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體瘦素受體結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂

β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體脂蛋白磷脂酶A2抗原腸道菌增菌液

內(nèi)收蛋白a1抗體腸上皮干蛋白（多肽）察氏培養(yǎng)基

α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體促黃體生成素抗原高鹽察氏培養(yǎng)基

膜粘連蛋白7抗體人促黃體生成素(多肽)察氏蛋白胨培養(yǎng)基

早老素γ分泌酶抗體人促黃體生成素受體抗原BS瓊脂

鈉ATP酶蛋白a1抗體L-組氨酸脫羧酶抗原膽鹽七葉苷疊氮鈉瓊脂

Rho鳥苷酸交換因子2抗體白血病抑制因子抗原M-腸球菌瓊脂

磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體白血病抑制因子受體抗原緩沖蛋白胨水增菌液

去整合素樣金屬蛋白酶9抗體Nogo受體作用蛋白抗原胰酶大豆酵母浸膏肉湯
MCF-10A 細(xì)胞鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體腦二磷膽 CYTIDINE-5'-DIPHOSPHOCHOLINE(P)Human, Mouse, Rat

受精卵抑制蛋白1抗體腦二磷膽 CYTIDINE-5'-DIPHOSPHOCHOLINE(P)Human, Mouse, Rat

鋅指蛋白471抗體豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse

γ-氨丁A受體相關(guān)膜蛋白3豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse

鋅指蛋白909抗體豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse

鋅指蛋白420抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human

周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human, Mouse

鋅指蛋白318抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human

鋅指蛋白281抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human, Mouse