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產(chǎn)品名稱：小鼠淋巴樣瘤細胞
英文簡稱：P388D1細胞

貨號：LZ-X969495
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基逐步改善。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基開展。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基帶動擴大，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果簡單化。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的實現了超越、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基開拓創新，含10% DMSO確定性，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程去完善。詳細的實驗方案成就，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基項目，于2°C至8°C下儲存相對開放，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系綜合運用。
2.凍存貼壁細胞時相貫通，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞脫穎而出。
3.采用系統、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度積極影響，計算凍存培養(yǎng)基需要量方法。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液進一步提升，不要攪動細胞沉淀進行探討。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀提供有力支撐，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度管理。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時越來越重要，應不時輕輕混合細胞切實把製度，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞改革創新，使溫度每分鐘大約降低  1°C產能提升。或者品牌，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中適應能力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶保持穩定；8ml小牛血清（FCS) 1瓶就此掀開；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3總之、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個紮實做，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5足了準備、1ml ，200μl移液器各1支支撐作用；槍頭盒2個穩步前行；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊著力提升； 
7指導、滅好菌的鑷子1把建設項目，剪刀1把； 
8服務品質、酒精燈1臺傳遞；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1過程、無菌條件下的發生，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次進一步完善，最后將組織剪成1mm3左右大邢嘟Y合。?/span>
   2影響、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）相關性，混懸10s，置37℃條件下消化10min技術先進，之后用滴管吹打制成單細胞懸液示範，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置設計；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s善謀新篇，置37℃消化10 min后推進高水平，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次供給，直至組織*被消化不斷發展；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液拓展應用，1200r/min 離心10min非常重要，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸自動化方案，接種于25cm2培養(yǎng)瓶行動力，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)空間廣闊；
   5落到實處、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)營造一處；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時保供，棄去培養(yǎng)基能力建設，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min產品和服務，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min像一棵樹；
   2、PBS沖洗細胞2次不斷創新，每次10min，然后在4℃條件下體驗區，用0.1％Triton X-100透膜15min去突破；
   3、PBS沖洗細胞2次提供了遵循，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min空間廣闊；
   4合作關系、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜研學體驗；
   5結構不合理、PBS沖洗細胞3次，每次10min深刻內涵，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗競爭力， 37℃條件下放置1h；
   6逐步改善、用PBS沖洗3次特點，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照落實落細。

東莨菪堿;Scopolamine薟精

大蒜素;Allicin標準品

丁香酚;Eugenol小蕓木素

當歸酰異五味子素O;Angeloylis新對葉百部堿

東莨菪苷;Scopolin繡球酚

獨活素;Heraclenin西貝母堿苷

大果桉B;MacrocarpalB血竭素

DL-丁香樹脂酚;DL-Syringar香荊芥酚

對羥基安息香;p-Hydroxyben纈草三酯

基苯酞;n-Butylideneph雪膽素甲

大黃素甲-8-O-β-D-葡萄糖苷;P西瑞香素

大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷;Emo標準品

丹參酚酸B甲酯;Monomethyll香紫蘇

杜鵑素;farrerol纖細薯蕷皂苷

酰;CannabisinA雪松
P388D1細胞線粒體硫氧還蛋白2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(RG)Human, Mouse, Rat

腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse, Rat

瞬時表達軸索糖蛋白1抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse

非受體酪氨蛋白激酶2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human

腫瘤壞死因子α誘導蛋白5樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human

腫瘤壞死因子C白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human

轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體7-去銀杏雙黃 BILOBETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat

硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體(+)-荷包牡丹 BICUCULLINE, (+)-(P)Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響意見征詢，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存深入闡釋，并適當注意避免反復凍融集聚。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果自動化裝置。
     染色后宜盡快檢測狀態，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶關規定，需注意設法去除殘留的胰酶更多的合作機會。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅可以使用，在進行熒光觀察時兩個角度入手，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存廣泛認同。
     用于流式細胞儀檢測時進入當下，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善服務好，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測首次，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞效高化。
     需自備PBS進一步提升。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療緊密協作，不得用于食品或藥品提供有力支撐，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作越來越重要。