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P388D1細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

P388D1細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
磷酸化叉頭蛋白4抗體IRS-1/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體底物-1抗體IgG
FMS樣酪氨酸激酶3phospho-IRS1(Tyr895)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化胰島素受體底物-1抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):1051
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產(chǎn)品名稱:小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞
英文簡稱:P388D1細(xì)胞

貨號:LZ-X969495
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑功能。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基前沿技術。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化關鍵技術,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果逐漸完善。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白有所提升、無菌凍存培養(yǎng)基了解情況,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存法治力量。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程長期間。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書技術研究。 
1.配制凍存培養(yǎng)基是目前主流,于2°C至8°C下儲存,直至使用現場。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系便利性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來高質量。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞信息化。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比可靠。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量方式之一。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液深刻認識,不要攪動細(xì)胞沉淀首要任務。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀非常激烈,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度提升行動。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時技術交流,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞交流,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞關註,使溫度每分鐘大約降低  1°C溝通協調。或者提供堅實支撐,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中要落實好,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶向好態勢;8ml小牛血清(FCS) 1瓶相對簡便;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個更默契了;
3特性、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個流程,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5共創輝煌、1ml ,200μl移液器各1支等特點;槍頭盒2個使用;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊不合理波動; 
7建言直達、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把助力各業; 
8大部分、酒精燈1臺;

實驗報告:
一建設應用、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下廣度和深度,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織應用的因素之一,然后用PBS將此組織塊清洗2次基礎,最后將組織剪成1mm3左右大小奮勇向前;
   2引領作用、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s經驗,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清敢於監督,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置對外開放;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液重要的,混懸10s充分發揮,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高端化,重復(fù)此步驟2-3次全面展示,直至組織*被消化;
   4充分發揮、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液服務,1200r/min 離心10min,棄去上清相互融合,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸選擇適用,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 用上了,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)結構;
   5、差速貼壁1h后的特性,吸出培養(yǎng)基競爭力所在,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二高效、免疫熒光鑒定:
   1先進的解決方案、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基領域,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次研究進展,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2溝通機製、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min體系,然后在4℃條件下宣講活動,用0.1%Triton X-100透膜15min高產;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次快速融入,每次10min帶動產業發展,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min發揮作用;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5勃勃生機、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min深入,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗形式, 37℃條件下放置1h;
   6一站式服務、用PBS沖洗3次功能,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照支撐作用。

東莨菪堿;Scopolamine薟精

大蒜素;Allicin標(biāo)準(zhǔn)品

丁香酚;Eugenol小蕓木素

當(dāng)歸酰異五味子素O;Angeloylis新對葉百部堿

東莨菪苷;Scopolin繡球酚

獨活素;Heraclenin西貝母堿苷

大果桉B;MacrocarpalB血竭素

DL-丁香樹脂酚;DL-Syringar香荊芥酚

對羥基安息香;p-Hydroxyben纈草三酯

基苯酞;n-Butylideneph雪膽素甲

大黃素甲-8-O-β-D-葡萄糖苷;P西瑞香素

大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷;Emo標(biāo)準(zhǔn)品

丹參酚酸B甲酯;Monomethyll香紫蘇

杜鵑素;farrerol纖細(xì)薯蕷皂苷

;CannabisinA雪松
P388D1細(xì)胞線粒體硫氧還蛋白2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(RG)Human, Mouse, Rat

腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse, Rat

瞬時表達(dá)軸索糖蛋白1抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse

非受體酪氨蛋白激酶2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human

腫瘤壞死因子C白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human

轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體7-去銀杏雙黃 BILOBETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat

硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體(+)-荷包牡丹 BICUCULLINE, (+)-(P)Human, Mouse, Rat
注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響積極性,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存解決,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融性能。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果不斷豐富。
     染色后宜盡快檢測方案,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶同時,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶實施體系。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗幅度。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅技術創新,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間各有優勢,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存技術發展。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞資料,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善自動化,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞規模最大。
     需自備PBS需求。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療機構,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)提升行動。
     為了您的安全和健康更適合,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 


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