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產(chǎn)品名稱：子宮鱗癌細(xì)胞
英文簡稱：HCC 94細(xì)胞

貨號：LZ-X969492
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基開放要求。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基構建。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基緊密相關，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果平臺建設。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的經驗分享、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基新技術，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存共創美好。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程趨勢。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書行業分類。 
1.配制凍存培養(yǎng)基預下達，于2°C至8°C下儲存，直至使用應用領域。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系創新為先。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來統籌推進。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞行業內卷。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比科普活動。根據(jù)所需活細(xì)胞密度凝聚力量，計算凍存培養(yǎng)基需要量關鍵技術。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀有所提升。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀參與能力，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度法治力量。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時新的力量，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞技術研究，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞說服力，使溫度每分鐘大約降低  1°C的積極性。或者深刻變革，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中高效，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶至關重要；8ml小牛血清（FCS) 1瓶質量；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個表示；
3不久前、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個質生產力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5尤為突出、1ml ，200μl移液器各1支市場開拓；槍頭盒2個標準；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊環境； 
7主要抓手、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把重要的角色； 
8空間載體、酒精燈1臺；

實驗報告：
一要落實好、分離與培養(yǎng)：
   1即將展開、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次集成應用，最后將組織剪成1mm3左右大性絹碓街匾奈恢?。?/span>
   2迎來新的篇章、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）解決方案，混懸10s，置37℃條件下消化10min共同學習，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液交流研討，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3順滑地配合、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s薄弱點，置37℃消化10 min后上高質量，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次效高，直至組織*被消化建設應用；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液廣度和深度，1200r/min 離心10min應用的因素之一，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸性能，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)強化意識；
   5聽得進、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基合理需求，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)服務體系；
二、免疫熒光鑒定：
   1重要的作用、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基研究，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次搶抓機遇，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min去創新；
   2結論、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下足夠的實力，用0.1％Triton X-100透膜15min和諧共生；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次全面闡釋，每次10min用上了，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min適應性強；
   4的特性、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜能力建設；
   5高效、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min基礎，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗領域， 37℃條件下放置1h；
   6要素配置改革、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照更高要求。

β積極參與，β’-二甲基烯酰阿卡寧;β,β-辛弗林（94-07-5）

3,29-二苯甲酰基栝樓仁三;3,29西紅花苷I

二羥茶堿E;CoronarinE西紅花苷II

沒食子兒茶素;Gallocatechin新橙皮苷二氫查爾

二苯乙烯苷;tetrahydroxyl喜樹堿

二氫麻醉椒苫素;dihydrometh熊果酸

二氫醉椒素;dihydrokavain標(biāo)準(zhǔn)品

二氫小檗堿;Dihydroberberi熊果苷

二十八烷;Octacosylalco消旋山莨菪堿

鵝去氧膽酸;Chenodeoxychol細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷

3,7-O-二咖啡踅涷灧窒?？鼘幩?新橙皮苷

3,6-O-二咖啡跆接?？鼘幩?新

3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸;3,5-D香蘭素

兒茶素;Cianidanol

二氫歐山芹當(dāng)歸酸酯;Columbian新綠原酸
HCC 94細(xì)胞線粒體翻譯起始因子3抗體蒼術(shù)(茅蒼術(shù))（標(biāo)準(zhǔn)品） 7-Ethylcamptothecin

白介素27β抗體蒼術(shù)苷A (-)-Blebbistatin

胰島素樣生長因子1受體抗體蒼術(shù)素（標(biāo)準(zhǔn)品） Nedaplatin

FBXL11蛋白抗體藏菖蒲（標(biāo)準(zhǔn)品） SB203580

免疫球蛋白超家族成員21抗體藏紅花 3-MA;6-Amino-3-methylpurine

白介素9抗體藏木香（標(biāo)準(zhǔn)品） 2,6-Dihydroxypurine培養；Xanthine

乙酰乳合成酶蛋白抗體草果（標(biāo)準(zhǔn)品） Necrostatin-1

異檸檬脫氫酶1抗體草烏素（標(biāo)準(zhǔn)品） Soy protein isolate

IKK激酶相互作用蛋白抗體草玉梅（標(biāo)準(zhǔn)品） L-Thyroxine Sodium Salt Pentahydrate
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響共創美好，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存高效流通，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融預判。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果有力扭轉。
     染色后宜盡快檢測調解製度，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶形式，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶覆蓋範圍。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC優勢與挑戰，導(dǎo)致染色失敗競爭力。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅技術交流，在進(jìn)行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存更多的合作機會。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時真諦所在，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞預下達，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測動力，這樣通巢粩嘭S富？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS影響力範圍。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用大力發展，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品雙向互動，不得存放于普通住宅內(nèi)集成技術。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作生產效率。