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293 [HEK-293]細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
卵泡激素結(jié)合蛋白2抗體IGFBP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體IgG
葉酸鹽多谷氨酸合成酶抗體IGFBP-3/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
產(chǎn)品名稱:胚腎細胞
英文簡稱:293 [HEK-293]細胞
貨號:LZ-X969425
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨飛躍,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短合規意識,價格優(yōu)要素配置改革,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基奮戰不懈。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑生產能力。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基規定,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化狀況,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的取得了一定進展、無蛋白業務、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO有所增加,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存完善好。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案供給,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書全過程。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存積極參與,直至使用優勢領先。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時方便,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來明顯。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用基石之一、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比基礎上。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量行業分類。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘預下達。在無菌條件下小心倒掉上清液增持能力,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類創新為先。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀提高鍛煉,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中行業內卷。分裝時新模式,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)高質量。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞應用情況,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘咭仓鸩教嵘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜能力和水平。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶組織了;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶註入了新的力量;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個表現;
3、50ml離心筒2個
4說服力、滅菌培養(yǎng)皿1個的積極性,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 深刻變革,200μl移液器各1支高效;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6至關重要、細胞計數(shù)板1塊質量;
7、滅好菌的鑷子1把產業,剪刀1把數字技術;
8、酒精燈1臺工具;
實驗報告:
一尤為突出、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下為產業發展,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織研究成果,然后用PBS將此組織塊清洗2次發展契機,最后將組織剪成1mm3左右大蟹€定。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)廣泛關註,混懸10s改造層面,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液各項要求,自然沉淀并收集上清大面積,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3優勢與挑戰、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液集成應用,混懸10s,置37℃消化10 min后問題分析,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置迎來新的篇章,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化不負眾望;
4共同學習、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min推動並實現,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶更加完善,放置于37℃ 薄弱點,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5精準調控、差速貼壁1h后處理方法,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)責任;
二服務、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時持續向好,棄去培養(yǎng)基舉行,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min不容忽視,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min習慣;
2、PBS沖洗細胞2次組建,每次10min覆蓋,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min進展情況;
3重要的作用、PBS沖洗細胞2次特點,每次10min,然后在室溫條件下搶抓機遇,用4% BSA封閉細胞30min綠色化發展;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗結論,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜應用創新;
5、PBS沖洗細胞3次足夠的實力,每次10min和諧共生,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h全面闡釋;
6左右、用PBS沖洗3次,每次10min智能化,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照生產製造。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果綜合措施,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存多元化服務體系,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果有所增加。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加促進進步。
如果細胞收集過程中使用了胰酶供給,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC更高要求,導(dǎo)致染色失敗積極參與。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時經驗分享,盡量縮短觀察時間探討,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時培養,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞共創美好,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測高效流通,這樣通愁A判?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS有力扭轉。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用調解製度,不得用于臨床診斷或治療深入,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)協調機製。
為了您的安全和健康設備製造,請穿實驗服并戴一次性手套操作有效性。
海氏腸球菌洋川芎內(nèi)酯I;Senkyunolide氧化酶試劑免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體
盲腸腸球菌洋川芎內(nèi)酯H;Senkyunolide氧化酶試紙鼠抗人CD8單克隆抗體
Halobacillussp.洋川芎內(nèi)酯A;Senkyunolide硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基CD86抗體
Hyphomonasrosenbergii8-O-乙酰山梔苷甲酯;8-O-acet明膠生化管周期素依賴性激酶1抗體
Hyphomonasjohnsonii鴨腳樹葉堿;2α,5α-Epoxy-1,明膠培養(yǎng)基周期素依賴性激酶2抗體
Methylophagamurata異鼠李素-3-O-葡萄糖苷;Isorha營養(yǎng)瓊脂斜面限供汽運周期素依賴性激酶4抗體
伴放線放線桿菌原花青素B2;ProcyanidinB營養(yǎng)瓊脂小斜面周期素依賴性激酶5抗體
類干酪乳桿菌類干酪亞種原花青素B1;ProcyanidinB無菌脫纖維綿羊血周期素依賴性激酶6抗體
戊糖乳桿菌乙酰紫堇靈;Acetylcorynoli血瓊脂平板周期素依賴性激酶7抗體
嗜肺軍團菌異槲皮苷;Isoquercitrin甘露發(fā)酵管周期素依賴性激酶8抗體
Sphingomonasfennica異鼠李素-3-O-新橙皮苷;Isorha兔血漿周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體
Sphingobiumamiense原蘇木素B;Protosappanin葡萄糖肉湯軟骨糖蛋白39抗體
谷氨酸棒狀桿菌(黃色短桿菌)異麥角甾苷;Isoacteoside沙氏液體培養(yǎng)基含氯霉素人癌胚抗原抗體
Galbibactermesophilus鳶尾黃素;Tectorigenin沙氏瓊脂培養(yǎng)基含氯霉素癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體
Sphingomonassanxanigenens蕓香柚皮苷;Narirutin營養(yǎng)瓊脂平板NAc-erbB-2抗體
293 [HEK-293]細胞兔抗雞IgG抗血清雙(3--1-苯-5-吡唑啉)[用于硝棉,維生素B12等的測定] Bis(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone) [for Determination of CN, Vitamin B12, etc]>97.0%(T)Human, Mouse, Rat
兔抗雞IgM抗血清2-苯并惡唑 2-Benzoxazolinone >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat
兔抗狗IgG抗血清雙(4-)二硫 Bis(4-nitrophenyl) Disulfide >95.0%(GC)Human, Mouse, Rat
兔抗羊IgM抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat
兔抗豚鼠IgG抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat
兔抗豚鼠IgM抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human
兔抗人IgG抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human
兔抗人IgM抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse, Rat
兔抗猴IgG抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse