產(chǎn)品名稱：胚腎細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：293 [HEK-293]細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969425
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑規模設備。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基支撐作用。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化至關重要，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果著力提升。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的深入闡釋、無(wú)蛋白要求、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基深入，含10% DMSO的必然要求，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程深度。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案助力各行，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基帶來全新智能，于2°C至8°C下儲(chǔ)存互動互補，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系自主研發。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)力度，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞意向。
3.采用持續發展、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度系統性，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量合作。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液損耗，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀勇探新路。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀開展面對面，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度供給。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)便利性，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞拓展應用，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞實事求是，使溫度每分鐘大約降低  1°C自動化方案。或者結構，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中空間廣闊，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶效果；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)生產效率；
3創新的技術、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5有序推進、1ml 適應性，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)深入開展；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6更優美、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把更為一致，剪刀1把； 
8道路、酒精燈1臺(tái)面向；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1空間廣闊、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織真諦所在，然后用PBS將此組織塊清洗2次研學體驗，最后將組織剪成1mm3左右大小提供深度撮合服務；
   2深刻內涵、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s最為突出，置37℃條件下消化10min逐步改善，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置落實落細；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液組成部分，混懸10s深入闡釋，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高效化，重復(fù)此步驟2-3次大大提高，直至組織*被消化；
   4去完善、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液意料之外，1200r/min 離心10min，棄去上清設備，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸橋梁作用，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)相貫通；
   5增產、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基系統，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)的方法；
二、免疫熒光鑒定：
   1方法、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)生產創效，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次進行探討，每次10min緊密協作，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2管理、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下切實把製度，用0.1％Triton X-100透膜15min優化上下；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次最新，每次10min發揮重要作用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min模樣；
   4取得顯著成效、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜數據顯示；
   5責任、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min特征更加明顯，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗長足發展， 37℃條件下放置1h；
   6足了準備、用PBS沖洗3次規模設備，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照穩步前行。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響至關重要，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存指導，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融建設項目。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)傳遞，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加充分。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶的發生。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC融合，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅相結合，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)提升，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存相關性。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)競爭力，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善的必然要求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)的過程中，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞狀況。
     需自備PBS延伸。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療要求，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)認為。
     為了您的安全和健康運行好，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
海氏腸球菌洋川芎內(nèi)酯I;Senkyunolide氧化酶試劑免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體

盲腸腸球菌洋川芎內(nèi)酯H;Senkyunolide氧化酶試紙鼠抗人CD8單克隆抗體

Halobacillussp.洋川芎內(nèi)酯A;Senkyunolide硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基CD86抗體

Hyphomonasrosenbergii8-O-乙酰山梔苷甲酯;8-O-acet明膠生化管周期素依賴性激酶1抗體

Hyphomonasjohnsonii鴨腳樹葉堿;2α,5α-Epoxy-1,明膠培養(yǎng)基周期素依賴性激酶2抗體

Methylophagamurata異鼠李素-3-O-葡萄糖苷;Isorha營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面限供汽運(yùn)周期素依賴性激酶4抗體

伴放線放線桿菌原花青素B2;ProcyanidinB營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面周期素依賴性激酶5抗體

類干酪乳桿菌類干酪亞種原花青素B1;ProcyanidinB無(wú)菌脫纖維綿羊血周期素依賴性激酶6抗體

戊糖乳桿菌乙酰紫堇靈;Acetylcorynoli血瓊脂平板周期素依賴性激酶7抗體

嗜肺軍團(tuán)菌異槲皮苷;Isoquercitrin甘露發(fā)酵管周期素依賴性激酶8抗體

Sphingomonasfennica異鼠李素-3-O-新橙皮苷;Isorha兔血漿周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體

Sphingobiumamiense原蘇木素B;Protosappanin葡萄糖肉湯軟骨糖蛋白39抗體

谷氨酸棒狀桿菌（黃色短桿菌）異麥角甾苷;Isoacteoside沙氏液體培養(yǎng)基含氯霉素人癌胚抗原抗體

Galbibactermesophilus鳶尾黃素;Tectorigenin沙氏瓊脂培養(yǎng)基含氯霉素癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體

Sphingomonassanxanigenens蕓香柚皮苷;Narirutin營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板NAc-erbB-2抗體
293 [HEK-293]細(xì)胞兔抗雞IgG抗血清雙(3--1-苯-5-吡唑啉)[用于硝棉,維生素B12等的測(cè)定] Bis(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone) [for Determination of CN, Vitamin B12, etc]>97.0%(T)Human, Mouse, Rat

兔抗雞IgM抗血清2-苯并惡唑 2-Benzoxazolinone >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat

兔抗狗IgG抗血清雙(4-)二硫 Bis(4-nitrophenyl) Disulfide >95.0%(GC)Human, Mouse, Rat

兔抗羊IgM抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat

兔抗豚鼠IgG抗血清雙(2-)二硫 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N)Human, Mouse, Rat

兔抗豚鼠IgM抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human

兔抗人IgG抗血清三酯 Trimethyl Borate >97.0%(T)Human

兔抗人IgM抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse, Rat

兔抗猴IgG抗血清三異酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)Human, Mouse