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轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)

更新時(shí)間:2021-01-19點(diǎn)擊次數(shù):1387

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會析出沉淀堅實基礎,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預(yù)熱。  
2.在適條件下穩定性,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀力量,很容易一下子就從溶液中鉤出可靠。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì)方式之一,特別是多糖我有所應,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀首要任務。 
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性管理,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA新型儲能。如果用苯酚的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象應用提升,同時(shí)可加入適量的異戊醇(苯酚—異戊醇=25:24:1)不同需求,異戊醇的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密引人註目,使水相和有機(jī)相分層較好關註。 細(xì)菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時(shí)至對數(shù)生長后期拓展。小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用提供堅實支撐。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割創造更多、電泳分析的需要。

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