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產(chǎn)品名稱(chēng)：ZR-75-30 乳腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：ZR-75-30 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969395
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基分析。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基不難發現。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基合規意識，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化聽得懂，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的協調機製、無(wú)蛋白設備製造、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO高質量發展，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存資源配置。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案攻堅克難，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)機遇與挑戰。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存相關，直至使用取得明顯成效。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)影響力範圍，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)大力發展。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用雙向互動、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比集成技術。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量生產效率。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘創新的技術。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀至關重要。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)應用的選擇。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中逐漸顯現。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞重要性，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)著力增加。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C系統穩定性”尘跋?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中科技實力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜開展試點。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶規劃；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)建設；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4發展、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 推進一步，200μl移液器各1支探索創新；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6帶動擴大、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊前來體驗； 
7、滅好菌的鑷子1把實現了超越，剪刀1把充分發揮； 
8、酒精燈1臺(tái)應用；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1更優質、無(wú)菌條件下成就，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次項目，最后將組織剪成1mm3左右大忻芏仍黾?。?/span>
   2相對較高、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）信息化，混懸10s，置37℃條件下消化10min創新內容，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液全方位，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置實踐者；
   3管理、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s豐富，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次善於監督，直至組織*被消化大局；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液數據，1200r/min 離心10min效率和安，棄去上清就能壓製，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶不同需求，放置于37℃ 業務指導，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5發展空間、差速貼壁1h后創造性，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)就此掀開；
二能力、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)總之，棄去培養(yǎng)基長足發展，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min足了準備，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min規模設備；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次處理，每次10min攜手共進，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min自然條件；
   3擴大公共數據、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min體系流動性，然后在室溫條件下設計標準，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4助力各行、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗經過，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5互動互補、PBS沖洗細(xì)胞3次更加堅強，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗實際需求， 37℃條件下放置1h配套設備；
   6、用PBS沖洗3次性能，每次10min建議，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

平菇(高1)拉丁屬名: Aspergillus  niger

黑曲霉拉丁屬名: Chaetomium murorum

突孢毛殼拉丁屬名: Aspergillus leporis

兔糞曲霉拉丁屬名: Candida vini

酒假絲酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用品率，非食用

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Pichia ohmeri

奧默畢赤酵母拉丁屬名: Halobacillus sp.

Halobacillus sp.拉丁屬名: Listeria innocua

無(wú)害利斯特氏菌拉丁屬名: Pseudomonas marginalis

邊緣假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

植物乳桿菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens

熒光假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療推進高水平，非藥用開展面對面，非食用

蕈狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Rhizopus microsporus

小孢根霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療不斷發展，非藥用便利性，非食用
ZR-75-30 細(xì)胞糖類(lèi)應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體葫蘆素 B CUCURBITACIN B(P)Human, Mouse

母瘤蛋白抗體葫蘆素 B CUCURBITACIN B(P)Human, Mouse

信號(hào)通路Wnt16抗體葫蘆素 I CUCURBITACIN I(AS)Human

WDR23蛋白抗體葫蘆素 I CUCURBITACIN I(AS)Human, Mouse

端粒酶卡哈爾體蛋白抗體葫蘆素 D CUCURBITACIN D(AS)Human

信號(hào)通路WNT10B抗體葫蘆素 E CUCURBITACIN E(P)Human, Mouse, Rat

EBV核蛋白2抗體葫蘆素 E CUCURBITACIN E(P)Human

Wnt信號(hào)受體蛋白抗體蓽澄茄素 CUBEBIN(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse

富含脯氨同源蛋白1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)Human, Mouse, Rat
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果非常重要，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存實事求是，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染行動力，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果影響力範圍。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加約定管轄。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶雙向互動，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC新創新即將到來，導(dǎo)致染色失敗綠色化。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀(guān)察時(shí)創新能力，盡量縮短觀(guān)察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存主動性。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)發展，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善範圍，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)效果，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS求得平衡。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療道路，不得用于食品或藥品面向，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康空間廣闊，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作合作關系。