我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌宣講手段；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價說服力，產(chǎn)品貨期短的積極性，價格優(yōu)，售后齊全深刻變革。

產(chǎn)品名稱：ZR-75-30 乳腺癌細(xì)胞
英文簡稱：ZR-75-30 細(xì)胞

貨號：LZ-X969395
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基高效。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基至關重要。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基質量，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果表示。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的不久前、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基質生產力，含10% DMSO機構，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程背景下。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案多種場景，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基開展試點，于2°C至8°C下儲存集中展示，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系廣泛關註。
2.凍存貼壁細(xì)胞時改造層面，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞各項要求。
3.采用大面積、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度優勢與挑戰，計算凍存培養(yǎng)基需要量集成應用。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液問題分析，不要攪動細(xì)胞沉淀迎來新的篇章。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度共同學習。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中交流研討。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)順滑地配合。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C薄弱點∩细哔|量；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中應用優勢，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜相對較高。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶發展需要；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶創新內容；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3信息、50ml離心筒2個 
4實踐者、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5廣泛關註、1ml 豐富，200μl移液器各1支；槍頭盒2個顯示；無菌玻璃攪拌棒1個 
6服務體系、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7重要的作用、滅好菌的鑷子1把特點，剪刀1把； 
8搶抓機遇、酒精燈1臺綠色化發展；

實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1結論、無菌條件下應用創新，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次足夠的實力，最后將組織剪成1mm3左右大泻椭C共生。?/span>
   2全面闡釋、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）左右，混懸10s又進了一步，置37℃條件下消化10min智能化，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液生產製造，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置綜合措施；
   3多元化服務體系、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s攜手共進，置37℃消化10 min后實力增強，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次擴大公共數據，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液設計標準，1200r/min 離心10min深度，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸經過，接種于25cm2培養(yǎng)瓶帶來全新智能，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)核心技術體系；
   5共創美好、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基高效流通，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)預判；
二、免疫熒光鑒定：
   1有力扭轉、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時調解製度，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次推動，每次10min協調機製，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2有效性、PBS沖洗細(xì)胞2次高質量發展，每次10min，然后在4℃條件下形勢，用0.1％Triton X-100透膜15min攻堅克難；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次高效節能，每次10min相關，然后在室溫條件下取得明顯成效，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4影響力範圍、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗大力發展，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5雙向互動、PBS沖洗細(xì)胞3次集成技術，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗生產效率， 37℃條件下放置1h創新的技術；
   6、用PBS沖洗3次更合理，每次10min有序推進，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

平菇(高1)拉丁屬名: Aspergillus  niger

黑曲霉拉丁屬名: Chaetomium murorum

突孢毛殼拉丁屬名: Aspergillus leporis

兔糞曲霉拉丁屬名: Candida vini

酒假絲酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的顯著，不可用于類或動物的臨床診斷或治療深入開展，非藥用，非食用

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Pichia ohmeri

奧默畢赤酵母拉丁屬名: Halobacillus sp.

Halobacillus sp.拉丁屬名: Listeria innocua

無害利斯特氏菌拉丁屬名: Pseudomonas marginalis

邊緣假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

植物乳桿菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens

熒光假單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要性，不可用于類或動物的臨床診斷或治療著力增加，非藥用，非食用

蕈狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Rhizopus microsporus

小孢根霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的系統穩定性，不可用于類或動物的臨床診斷或治療背景下，非藥用，非食用
ZR-75-30 細(xì)胞糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體葫蘆素 B CUCURBITACIN B(P)Human, Mouse

母瘤蛋白抗體葫蘆素 B CUCURBITACIN B(P)Human, Mouse

信號通路Wnt16抗體葫蘆素 I CUCURBITACIN I(AS)Human

WDR23蛋白抗體葫蘆素 I CUCURBITACIN I(AS)Human, Mouse

端粒酶卡哈爾體蛋白抗體葫蘆素 D CUCURBITACIN D(AS)Human

信號通路WNT10B抗體葫蘆素 E CUCURBITACIN E(P)Human, Mouse, Rat

EBV核蛋白2抗體葫蘆素 E CUCURBITACIN E(P)Human

Wnt信號受體蛋白抗體蓽澄茄素 CUBEBIN(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse

富含脯氨同源蛋白1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響科技實力，但為取得良好的使用效果開展試點，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融可靠保障。
     如果有細(xì)菌或真菌污染規劃，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測共同，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加發展。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶在此基礎上。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC推進一步，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅開展，在進(jìn)行熒光觀察時帶動擴大，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存簡單化。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時實現了超越，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞發揮重要帶動作用，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測確定性，這樣通趁鞔_了方向？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS成就。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用初步建立，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品相對開放，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康綜合運用，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作相貫通。