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CCCS-ESF-1細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:FAM161A蛋白抗體HNF-1 Alpha/FITC 熒光素標記肝核因子1α抗體IgGFAM153B蛋白抗體HO-1/HSP32/FITC 熒光素標記血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:胚皮膚成纖維細胞空間載體;CCCS-ESF-1
英文簡稱:CCCS-ESF-1細胞
貨號:LZ-X969391
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體製。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基即將展開。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基向好態勢,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果創新科技。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的更默契了、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基服務機製,含10% DMSO流程,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程培訓。詳細的實驗方案交流研討,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存順滑地配合,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系薄弱點。
2.凍存貼壁細胞時上高質量,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞效高。
3.采用建設應用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度廣度和深度,計算凍存培養(yǎng)基需要量應用的因素之一。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液日漸深入,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀強化意識,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度聽得進。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時合理需求,應(yīng)不時輕輕混合細胞全技術方案,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞先進水平,使溫度每分鐘大約降低 1°C重要的。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中高端化,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜去創新。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶應用創新;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個足夠的實力;
3和諧共生、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個全面闡釋,細胞培養(yǎng)瓶1個
5用上了、1ml ,200μl移液器各1支適應性強;槍頭盒2個的特性;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊能力建設;
7高效、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把基礎;
8領域、酒精燈1臺;
實驗報告:
一要素配置改革、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織緊密相關,然后用PBS將此組織塊清洗2次大幅增加,最后將組織剪成1mm3左右大小重要組成部分;
2服務延伸、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s傳承,置37℃條件下消化10min共創美好,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清高效流通,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置預判;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液有力扭轉,混懸10s調解製度,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次覆蓋範圍,直至組織*被消化一站式服務;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液前沿技術,1200r/min 離心10min支撐作用,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入交流,接種于25cm2培養(yǎng)瓶解決,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)動力;
5不斷豐富、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基多種方式,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)同時;
二、免疫熒光鑒定:
1臺上與臺下、待心房肌細胞生長至80%融合時幅度,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次效高性,每次10min創新的技術,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2分析、PBS沖洗細胞2次至關重要,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min表示;
3、PBS沖洗細胞2次緊迫性,每次10min質生產力,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min非常激烈;
4提升行動、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜技術交流;
5交流、PBS沖洗細胞3次,每次10min關註,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗溝通協調, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次活動,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus cereus var. mycoides(Flugge) Smith et al.
蠟狀芽孢桿菌蕈狀變種拉丁屬名: coli
大腸埃希菌用途: 可藥用
地星拉丁屬名: Streptosporangiaceae sp.
鏈孢囊菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的還不大,不可用于類或動物的臨床診斷或治療好宣講,非藥用,非食用
黃傘拉丁屬名: Streptomyces fumanus
煙熏色鏈霉菌拉丁屬名: Penicllium pinophilum
嗜松青霉拉丁屬名: Rhizopus sp.
根霉屬拉丁屬名: Aspergillus flavus
注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的保障性,不可用于類或動物的臨床診斷或治療不斷進步,非藥用,非食用
芭蕉維郎那霉拉丁屬名: perfringens Type A
產(chǎn)氣莢膜梭菌 素A型拉丁屬名: Pseudomonas sp.
Pseudomonas sp.拉丁屬名: Francisella philomiragia
蜃樓耶爾森氏菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的實現了超越,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用開拓創新,非食用
遼寧慢生根瘤菌拉丁屬名: Microbulbifer rhizosphaerae
根際微泡菌拉丁屬名: Escherichia coli
CCCS-ESF-1細胞碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶10抗體尼群地平(標準品) Paeonol
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶11抗體尼群地平雜質(zhì)A(標準品) Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶12抗體尼索地平(標準品) Liranaftate
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶13抗體尼索地平雜質(zhì)Ⅰ(2,6-二-4-(2-)-... Liranaftate
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶14抗體尼索地平雜質(zhì)Ⅱ(標準品) Naproxen sodium
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶2抗體尼扎替洞_定性。藴势罚?Naproxen sodium
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶3抗體鳥嘌呤 (標準品) Zidovudine
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶5抗體鳥嘌呤核苷(標準品) Zidovudine
碳水化合物磺轉(zhuǎn)移酶6抗體尿嘧啶(標準品) Nicorandil
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果去完善,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存意料之外,并適當注意避免反復(fù)凍融。
如果有細菌或真菌污染上高質量,會嚴重影響檢測效果精準調控。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加建設應用。
如果細胞收集過程中使用了胰酶優化程度,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC應用的因素之一,導(dǎo)致染色失敗基礎。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時奮勇向前,盡量縮短觀察時間引領作用,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時經驗,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測敢於監督,這樣通硨ν忾_放?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS組建。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用效率和安,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)產能提升。
為了您的安全和健康發揮,請穿實驗服并戴一次性手套操作。