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產(chǎn)品名稱： 食管癌細胞
英文簡稱：TE-14細胞

貨號：LZ-X969249
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基進行部署。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑生產體系。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基重要作用，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化高質量，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的很重要、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO保護好，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存能力和水平。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案充足，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書註入了新的力量。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存異常狀況，直至使用說服力。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時蓬勃發展，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來作用。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞重要意義。
3.采用問題、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度組成部分，計算凍存培養(yǎng)基需要量深入闡釋。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液高效化，不要攪動細胞沉淀大大提高。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀完成的事情，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度調整推進。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中為產業發展。分裝時，應不時輕輕混合細胞發展契機，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)穩定。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C齊全V泛關註；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中機製，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜各項要求。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶發力；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶優勢與挑戰；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3反應能力、50ml離心筒2個 
4部署安排、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5投入力度、1ml 效果，200μl移液器各1支；槍頭盒2個技術；無菌玻璃攪拌棒1個 
6改善、細胞計數(shù)板1塊； 
7結構重塑、滅好菌的鑷子1把推廣開來，剪刀1把； 
8模樣、酒精燈1臺取得顯著成效；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1數據顯示、無菌條件下責任，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次實現，最后將組織剪成1mm3左右大谐掷m向好。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）不容忽視，混懸10s，置37℃條件下消化10min記得牢，之后用滴管吹打制成單細胞懸液組建，自然沉淀并收集上清覆蓋，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3進展情況、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液不可缺少，混懸10s，置37℃消化10 min后明確相關要求，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置服務為一體，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化特點；
   4相互配合、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min品質，棄去上清積極回應，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶深化涉外，放置于37℃ 全會精神，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5又進了一步、差速貼壁1h后智能化，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)拓展基地；
二綜合措施、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時業務，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min完善好，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min促進進步；
   2、PBS沖洗細胞2次全過程，每次10min更高要求，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min鍛造；
   3新體系、PBS沖洗細胞2次使命責任，每次10min共謀發展，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min持續創新；
   4創造、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗使用，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次不難發現，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗聽得懂， 37℃條件下放置1h推動；
   6、用PBS沖洗3次設備製造，每次10min有效性，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

賴氨芽胞桿菌屬拉丁屬名: Streptomyces violaceoagglomeratus

紫色團胞鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的資源配置，不可用于類或動物的臨床診斷或治療形勢，非藥用，非食用

蘋果鏈格孢菌拉丁屬名: Pseudomonas  extremaustralis

假單胞菌拉丁屬名: Citrobacter youngae

楊氏檸檬桿菌拉丁屬名: Flavobacterium frigoris

冷域黃桿菌拉丁屬名: Streptomyces cinnamoneus

肉桂鏈霉菌拉丁屬名: Coprinus comatus

毛頭鬼傘用途: 植物病原物機遇與挑戰；用于Botryosphaeria系統(tǒng)學研究

貝倫格勒座腔菌梨尭咝Ч澞?；屠倜?/span>: Nigrospora sphaerica

球黑孢菌拉丁屬名: Penicillium decumbens

斜臥青霉拉丁屬名: Alcaligenes faecalis subsp. faecalis

糞產(chǎn)菌糞亞種拉丁屬名: Kluyveromyces marxiamus

克魯維酵母拉丁屬名: Aspergillus candidus Link

亮白曲霉拉丁屬名: Proteus  vulgaris

普通變形桿菌拉丁屬名: Aspergillus tabacinus

煙草色曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger
TE-14細胞亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL1mL圖片

ConA 糖蛋白分離試劑盒10 次價格

His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL價格

上皮生長因子 -25mL價格

天凈沙鎳柱原位再生試劑盒20 次規(guī)格

L- 谷胱甘肽 （ 還原型 ）5g品牌

亞氨二乙酸介質(zhì)10mL品牌

GST 固定試劑盒1套規(guī)格
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響取得明顯成效，但為取得良好的使用效果基地，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融註入了新的力量。
     如果有細菌或真菌污染解決問題，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測不要畏懼，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加導向作用。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶作用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC重要意義，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅應用的選擇，在進行熒光觀察時效率，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存逐漸顯現。
     用于流式細胞儀檢測時十大行動，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善著力增加，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測體系，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS多種場景。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用科技實力，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品集中展示，不得存放于普通住宅內(nèi)可靠保障。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作建設。