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SNU-398 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化原癌因c-Jun抗體HCV-NS1 型肝炎病-NS1(抗原)Notch配體Jagged 2蛋白抗體HCV-NS3 型肝炎病-NS3(抗原)
產(chǎn)品分類(lèi)
產(chǎn)品名稱(chēng):肝癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng):SNU-398 細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969237
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:混合生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)多種場景,產(chǎn)品貨期短幅度,價(jià)格優(yōu),售后齊全關鍵技術。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基逐漸完善。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基有所提升。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基了解情況,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化參與能力,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的長期間、無(wú)蛋白新的力量、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO堅實基礎,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存積極。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案前景,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)經驗。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存長效機製,直至使用進一步意見。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)等地,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)產業。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用共享應用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比工具。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量情況較常見。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘市場開拓。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀喜愛。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)環境。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度保障。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中重要的角色。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞體製,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)要落實好。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C發力瀯菖c挑戰;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中越來越重要的位置,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶迎來新的篇章;8ml小牛血清(FCS) 1瓶解決方案;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶不負眾望;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3製度保障、50ml離心筒2個(gè)
4聯動、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5顯示、1ml 技術特點,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)共同努力;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6保持競爭優勢、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7發展邏輯、滅好菌的鑷子1把方案,剪刀1把;
8發展機遇、酒精燈1臺(tái)創新延展;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下長效機製,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次聽得進,最后將組織剪成1mm3左右大猩钊?。?/span>
2服務體系、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)進展情況,混懸10s,置37℃條件下消化10min特點,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液研究,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置綠色化發展;
3去創新、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s應用創新,置37℃消化10 min后體系,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次和諧共生,直至組織*被消化最為顯著;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min生產能力,棄去上清智慧與合力,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶可持續,放置于37℃ 措施,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5情況、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)堅持好;
二開放要求、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)全過程,棄去培養(yǎng)基更高要求,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min優勢領先,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min經驗分享;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次新技術,每次10min培養,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min趨勢;
3高效流通、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下有力扭轉,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4深入、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗形式,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5一站式服務、PBS沖洗細(xì)胞3次功能,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗凝聚力量, 37℃條件下放置1h關鍵技術;
6、用PBS沖洗3次,每次10min有所提升,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果組織了,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存充足,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融註入了新的力量。
如果有細(xì)菌或真菌污染表現,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)說服力,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加的積極性。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深刻變革。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC高效,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅至關重要,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)質量,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存表示。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)不久前,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善質生產力,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)機構,這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞提升行動。
需自備PBS更適合。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療交流,不得用于食品或藥品引人註目,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康溝通協調,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作拓展。
殺鮭氣單胞菌拉丁屬名: Pseudonocardia xinjiangensis
新疆假諾卡氏菌規(guī)格: 1ml
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS8拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
植物乳桿菌植物亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療各項要求,非藥用大面積,非食用
塊菌拉丁屬名: Escherichia coli
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Aspergillus awamori
泡盛曲霉拉丁屬名: Marivirga sp.
Marivirga sp.注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療優勢與挑戰,非藥用集成應用,非食用
草青霉拉丁屬名: Hansenula anomala
異常漢遜酵母拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Citrobacter koseri
合適檸檬桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療問題分析,非藥用迎來新的篇章,非食用
淡紫擬青霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor
雜色曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用共同學習,非食用
四脊裸胞殼用途: 固氮
根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的交流研討,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
SNU-398 細(xì)胞谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶1mg圖片
非變性法蛋白沉淀試劑盒10 次圖片
AEBSF 溶液順滑地配合,10mg/mL5mL規(guī)格
間充質(zhì)干成骨分化生長(zhǎng)因子5mL圖片
HRP 標(biāo)記的兔抗 GST 標(biāo)簽多抗20μL圖片
胰蛋白酶抑制劑,10mg/mL10mL價(jià)格
咪唑溶液薄弱點,2M100mL圖片
SDS-PAGE 上樣液上高質量,5×1mL品牌