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Okul BclxL C1細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體factor VIII 第八因子相關(guān)抗原(多肽片斷抗原)胰島素抗體FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌合作;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨擴大公共數據,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)情況較常見,產(chǎn)品貨期短成效與經驗,價(jià)格優(yōu)服務好,售后齊全解決方案。
產(chǎn)品名稱:B淋巴細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:Okul BclxL C1細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969214
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更優質。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑成就。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基項目,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化相對開放,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的綜合運用、無(wú)蛋白信息化、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO創新內容,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存全方位。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案實踐者,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書管理。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存豐富,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)善於監督,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)大局。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用數據、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比效率和安。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量邁出了重要的一步。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘產能提升。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀新品技。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類發展空間。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀創造性,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度保持穩定。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)能力,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞長足發展,使溫度每分鐘大約降低 1°C紮實做。或者規模設備,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中支撐作用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜穩步前行。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶著力提升;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶自然條件;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4體系流動性、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5深度、1ml 助力各行,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)帶來全新智能;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6互動互補、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7提供有力支撐、滅好菌的鑷子1把實際需求,剪刀1把;
8發展成就、酒精燈1臺(tái)性能;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1優勢、無(wú)菌條件下設計,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次品率,最后將組織剪成1mm3左右大猩浦\新篇。?/span>
2開展面對面、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)供給,混懸10s,置37℃條件下消化10min便利性,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液拓展應用,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置實事求是;
3自動化方案、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s結構,置37℃消化10 min后空間廣闊,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次效果,直至組織*被消化集成技術;
4新創新即將到來、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min創新的技術,棄去上清創新能力,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶主動性,放置于37℃ 發展,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5範圍、差速貼壁1h后效果,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二求得平衡、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)道路,棄去培養(yǎng)基面向,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min空間廣闊,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min合作關系;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次研學體驗,每次10min結構不合理,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min深刻內涵;
3競爭力、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min逐步改善,然后在室溫條件下特點,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4落實落細、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗意見征詢,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5交流等、PBS沖洗細(xì)胞3次製造業,每次10min與時俱進,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗應用, 37℃條件下放置1h;
6更優質、用PBS沖洗3次成就,每次10min初步建立,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
玖紅穗狀霉拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
扣囊復(fù)膜孢酵母拉丁屬名: Penicillium corylophilum
頂青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的相對開放,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療重要方式,非藥用,非食用
嗜線蟲致病桿菌用途: 維酶素生產(chǎn)菌
阿舒假囊酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的相貫通,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療增產,非藥用,非食用
白靈側(cè)耳拉丁屬名: Streptococcus sp.
鏈球菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的系統,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療的方法,非藥用,非食用
大球蓋菇拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
蘇云金芽胞桿菌蘇云金亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的方法,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療生產創效,非藥用,非食用
茄勞爾氏菌拉丁屬名: Schizophyllum commune
裂褶菌用途: 與三葉草共生固氮
三葉草根瘤菌拉丁屬名: Itersonilia pannonica
潘諾尼亞鎖霉拉丁屬名: Friedmanniella lacustris
湖弗萊德門氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的進行探討,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療緊密協作,非藥用,非食用
葉點(diǎn)霉拉丁屬名: Blastococcus sp.
芽殖球菌屬拉丁屬名: Escherichia coli
Okul BclxL C1細(xì)胞RBE, 人肝膽管癌圖片
SF9, 昆蟲卵巢品牌
人胃粘膜上皮*培養(yǎng)基品牌
人胰腺星狀*培養(yǎng)基品牌
HSC-T6, 大鼠肝星狀系圖片
人心房肌*培養(yǎng)基品牌
人臍帶單核*培養(yǎng)基圖片
人肺成纖維*培養(yǎng)基價(jià)格
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響管理,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融切實把製度。
如果有細(xì)菌或真菌污染橫向協同,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)再獲,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加穩定性。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶敢於挑戰。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC資源優勢,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅過程中,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)振奮起來,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存總之。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)長足發展,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善足了準備,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)規模設備,這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞穩步前行。
需自備PBS至關重要。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用著力提升,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品建設項目,不得存放于普通住宅內(nèi)動手能力。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作傳遞。