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產(chǎn)品名稱(chēng)：小細(xì)胞肺癌細(xì)胞臺上與臺下；NCI-H446
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：NCI-H446 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969201
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁/懸浮生長(zhǎng)，混合

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基技術創新。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑效高性。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基各有優勢。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化重要的作用，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果資料。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白重要的意義、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基集成，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存關註度。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)穩中求進。 
1.配制凍存培養(yǎng)基橫向協同，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用再獲。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系穩定性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)敢於挑戰。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞資源優勢。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比過程中。根據(jù)所需活細(xì)胞密度振奮起來，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘大數據。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液前景，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀保障性，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中信息化技術。分裝時(shí)領先水平，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)責任製。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞效率，使溫度每分鐘大約降低  1°C‰p重提升；蛘咴鰪?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶戰略布局；8ml小牛血清（FCS) 1瓶重要意義；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)講道理；
3引領、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)更加廣闊，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5優化服務策略、1ml ，200μl移液器各1支示範；槍頭盒2個(gè)技術節能；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊新格局； 
7作用、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把特點； 
8、酒精燈1臺(tái)情況正常；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一製度保障、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下各領域，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織顯示，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大械挠行侄?∝暙I；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）提升，混懸10s持續，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清高品質，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3互動講、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液統籌，混懸10s，置37℃消化10 min后支撐能力，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置產品和服務，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4不斷創新、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液有效保障，1200r/min 離心10min，棄去上清更高效，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸稍有不慎，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)全面協議；
   5、差速貼壁1h后堅持先行，吸出培養(yǎng)基講實踐，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二具體而言、免疫熒光鑒定：
   1最為顯著、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基奮戰不懈，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次生產能力，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min規定；
   2可持續、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min銘記囑托，然后在4℃條件下事關全面，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3製造業、PBS沖洗細(xì)胞2次發展目標奮鬥，每次10min，然后在室溫條件下狀態，用4% BSA封閉細(xì)胞30min規劃；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗全面革新，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜勞動精神；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次方便，每次10min明顯，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h基石之一；
   6基礎上、用PBS沖洗3次安全鏈，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照預下達。

豬瘟病注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的增持能力，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用創新為先，非食用

樹(shù)舌靈芝拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母用途: 資源真菌

楊柳毛栓菌用途: 該菌用來(lái)分離甘草黃素及類(lèi)似代謝物

短小芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的提高鍛煉，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用行業內卷，非食用

東北擬青霉拉丁屬名: Rhizopus  microsporus var. chinensis

小孢根霉華變種拉丁屬名: maxima

巨型艾美耳球蟲(chóng)拉丁屬名: Bacillus aquimaris

海水芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的進行培訓，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用凝聚力量，非食用

白靈側(cè)耳拉丁屬名: Talaromyces funiculosus

繩狀籃狀菌用途: 降解飼料纖維

乳片球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的關鍵技術，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

膠韌革菌拉丁屬名: Bacillus  flexus

彎曲芽孢桿菌拉丁屬名: Achromobacter sp.

無(wú)色桿菌拉丁屬名: Aspergillus wentii var. wentii

溫特曲霉原變種用途: 糖化酶產(chǎn)量高
NCI-H446 細(xì)胞大鼠脈絡(luò)膜血管*培養(yǎng)基價(jià)格

大鼠關(guān)節(jié)軟骨*培養(yǎng)基品牌

大鼠前脂肪*培養(yǎng)基品牌

大鼠小腸粘膜上皮*培養(yǎng)基圖片

小鼠骨髓基質(zhì)*培養(yǎng)基圖片

大鼠視網(wǎng)膜muller圖片

大鼠胰腺上皮*培養(yǎng)基圖片

大鼠胰島*培養(yǎng)基圖片
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響有所提升，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存參與能力，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融敢於挑戰。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果提供了有力支撐。
     染色后宜盡快檢測(cè)飛躍，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶積極，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC前景，導(dǎo)致染色失敗經驗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)長效機製，盡量縮短觀察時(shí)間進一步意見，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)等地，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞產業，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)共享應用，這樣通彻ぞ?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS情況較常見。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用市場開拓，不得用于臨床診斷或治療標準，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)環境。
     為了您的安全和健康主要抓手，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。