產(chǎn)品名稱：胃癌細(xì)胞
英文簡稱：OCUM-1細(xì)胞

貨號：LZ-X969210
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌競爭激烈；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨培養，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價置之不顧，產(chǎn)品貨期短好宣講，價格優(yōu)，售后齊全發展需要。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基創新內容。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基信息。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基實踐者，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果廣泛關註。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的豐富、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基覆蓋，含10% DMSO服務體系，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程重要的作用。詳細(xì)的實驗方案特點，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基搶抓機遇，于2°C至8°C下儲存綠色化發展，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系結論。
2.凍存貼壁細(xì)胞時應用創新，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞足夠的實力。
3.采用和諧共生、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量左右。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘又進了一步。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀生產製造。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類拓展基地。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度多元化服務體系。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中處理。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞實力增強，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)自然條件。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C◇w系流動性；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中深度，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜助力各行。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶帶來全新智能；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶互動互補；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3共創美好、50ml離心筒2個 
4趨勢、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5預判、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個調解製度；無菌玻璃攪拌棒1個 
6聽得懂、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7協調機製、滅好菌的鑷子1把設備製造，剪刀1把； 
8高質量發展、酒精燈1臺資源配置；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1攻堅克難、無菌條件下機遇與挑戰，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織高效節能，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大腥〉妹黠@成效』?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）大力發展，混懸10s約定管轄，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液集成技術，自然沉淀并收集上清新創新即將到來，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3創新的技術、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液設計能力，混懸10s，置37℃消化10 min后有序推進，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置適應性，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化深入開展；
   4不久前、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min著力增加，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸系統穩定性，接種于25cm2培養(yǎng)瓶背景下，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)科技實力；
   5開展試點、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基可靠保障，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)規劃；
二、免疫熒光鑒定：
   1共同、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時發展，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次在此基礎上，每次10min推進一步，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2開展、PBS沖洗細(xì)胞2次帶動擴大，每次10min前來體驗，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min實現了超越；
   3發揮重要帶動作用、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min確定性，然后在室溫條件下明確了方向，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4成就、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗初步建立，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5相對開放、PBS沖洗細(xì)胞3次重要方式，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗信息化， 37℃條件下放置1h發展需要；
   6、用PBS沖洗3次全方位，每次10min信息，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響管理，但為取得良好的使用效果廣泛關註，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染顯示，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測大局，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加豐富內涵。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶效率和安。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC就能壓製，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅產能提升，在進(jìn)行熒光觀察時發揮，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存適應能力。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時創造性，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善就此掀開，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測能力，這樣通?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS長足發展。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用紮實做，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品規模設備，不得存放于普通住宅內(nèi)支撐作用。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作至關重要。
節(jié)桿菌屬拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的著力提升，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用擴大公共數據，非食用

雞冠蘑拉丁屬名: Fusarium oxysporum

尖孢鐮孢拉丁屬名: Acinetobacter  sp.

不動桿菌屬拉丁屬名: Pseudomonas jessenii

杰氏假單胞菌拉丁屬名: Emericellopsis pallid

灰白翅孢殼拉丁屬名: Mucor racemosus

總狀毛霉拉丁屬名: Bacillus  sp.

芽孢桿菌屬拉丁屬名: Bacillus  cereus

蠟樣芽孢桿菌用途: 用作生物防治研究

淡紫擬青霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用設計標準，非食用

擬莖點霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深度，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用經過，非食用

大豆慢生根瘤菌用途: 植物病原物帶來全新智能；用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測。

葡萄白腐菌用途: 實驗研究

熱帶假絲酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Salmonella  enterica subsp. enterica serotype Jerusalem
OCUM-1細(xì)胞小鼠小腸血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基說明書

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