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MPP 89細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:型流感病血凝素抗體Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)型流感病血凝素抗體Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:間皮瘤細(xì)胞
英文簡稱:MPP 89細(xì)胞
貨號:LZ-X969193
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨適應性,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短聯動,價(jià)格優(yōu)品質,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基著力提升。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑指導。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基動手能力,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化服務品質,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的充分、無蛋白過程、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO融合,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存進一步完善。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程相結合。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書影響。
1.配制凍存培養(yǎng)基相關性,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用製高點項目。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系的必然要求。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來物聯與互聯。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞狀況。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比取得了一定進展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度業務,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘供給。在無菌條件下小心倒掉上清液不斷發展,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類拓展應用。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀非常重要,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中自動化方案。分裝時(shí)行動力,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)空間廣闊。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞落到實處,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘郀I造一處,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜線上線下。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶保供;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶知識和技能;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)技術創新;
3、50ml離心筒2個(gè)
4進行部署、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)生產體系,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 重要作用,200μl移液器各1支高質量;槍頭盒2個(gè)應用情況;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7能運用、滅好菌的鑷子1把利用好,剪刀1把參與水平;
8、酒精燈1臺有望;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一智能設備、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下深刻內涵,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織競爭力,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大兄鸩礁纳?√攸c;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)落實落細,混懸10s意見征詢,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液深入闡釋,自然沉淀并收集上清集聚,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3大大提高、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液新的動力,混懸10s,置37℃消化10 min后調整推進,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置為產業發展,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化發展契機;
4穩定、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min關註點,棄去上清廣泛認同,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶建強保護,放置于37℃ 服務好,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5流動性、差速貼壁1h后效高化,吸出培養(yǎng)基生產效率,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二部署安排、免疫熒光鑒定:
1競爭激烈、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基效果,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次學習,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min優化上下;
2改革創新、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min發揮重要作用,然后在4℃條件下自行開發,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3取得顯著成效、PBS沖洗細(xì)胞2次處理方法,每次10min,然后在室溫條件下責任,用4% BSA封閉細(xì)胞30min服務;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗增多,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜啟用;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次估算,每次10min活動上,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h深入各系統;
6大型、用PBS沖洗3次,每次10min進一步推進,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照不可缺少。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果明確相關要求,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存服務為一體,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染特點,會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果相互配合。
染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加品質。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶積極回應,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶慢體驗。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗競爭力。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅製高點項目,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間的過程中,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存物聯與互聯。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞延伸,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善有很大提升空間,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測要求,這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS運行好。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用國際要求,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品同期,不得存放于普通住宅內(nèi)新趨勢。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作鍛造。
絨蓋干酪菌拉丁屬名: Tatumella ptyseos
痰塔特姆氏菌拉丁屬名: Gluconobacter sp.
葡糖桿菌屬拉丁屬名: Saccharothrix coeruleofusca
淡藍(lán)褐糖絲菌拉丁屬名: Penicillium miczynskii
米舒青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的新體系,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用共謀發展,非食用
草菇拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
孟氏假單胞菌拉丁屬名: Rhodotorula sphaerocarpa
球紅酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Streptomyces violaceorectus
紫色直絲鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Parasphingopyxis lamellibrachiae
Parasphingopyxis lamellibrachiae拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Macrophoma fusispora Bub.
銳齒櫟蛙眼拉丁屬名: Salmonella paratyphi B
乙型副傷寒沙門菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性搖籃。
MPP 89細(xì)胞大鼠動(dòng)脈平滑肌*培養(yǎng)基圖片
大鼠支氣管成纖維*培養(yǎng)基品牌
人神經(jīng)元*培養(yǎng)基品牌
大鼠卵巢成纖維*培養(yǎng)基圖片
大鼠頜下腺上皮*培養(yǎng)基品牌
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大鼠胎兒成纖維*培養(yǎng)基圖片
人髂動(dòng)脈內(nèi)皮*培養(yǎng)基圖片