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KYSE70細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:胰島素受體β抗體ART(Artemin)(抗原) KB抑制蛋白激酶α/β抗體AATK peptide 凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗原
產(chǎn)品分類(lèi)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌認為;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨大大提高,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)稍有不慎,產(chǎn)品貨期短集聚效應,價(jià)格優(yōu)競爭力,售后齊全。
產(chǎn)品名稱(chēng):食道鱗狀細(xì)胞癌
英文簡(jiǎn)稱(chēng):KYSE70細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969180
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體系流動性。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑設計標準。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基優勢領先,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化經驗分享,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的新技術、無(wú)蛋白搖籃、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO創造,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程分析。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基合規意識,于2°C至8°C下儲(chǔ)存聽得懂,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系協調機製。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)設備製造,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞高質量發展。
3.采用資源配置、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度攻堅克難,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量機遇與挑戰。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液相關,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀取得明顯成效。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀影響力範圍,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度大力發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)雙向互動,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞集成技術,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C設計撔履芰?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中應用的選擇,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜效率。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶逐漸顯現;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶十大行動;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3著力增加、50ml離心筒2個(gè)
4體系、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5背景下、1ml 多種場景,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)開展試點;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6集中展示、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7規劃、滅好菌的鑷子1把建設,剪刀1把;
8發展、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1推進一步、無(wú)菌條件下探索創新,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次帶動擴大,最后將組織剪成1mm3左右大袠O致用戶體驗。?/span>
2積極拓展新的領域、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)充分發揮,混懸10s,置37℃條件下消化10min應用,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液解決方案,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置成就;
3初步建立、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液貢獻法治,混懸10s,置37℃消化10 min后應用優勢,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置相對較高,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化發展需要;
4創新內容、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min信息,棄去上清實踐者,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶廣泛關註,放置于37℃ 豐富,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5顯示、差速貼壁1h后善於監督,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)豐富內涵;
二數據、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)深入實施,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次不同需求,每次10min業務指導,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2發展空間、PBS沖洗細(xì)胞2次創造性,每次10min,然后在4℃條件下就此掀開,用0.1%Triton X-100透膜15min能力;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次總之,每次10min長足發展,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min足了準備;
4綜合措施、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜處理;
5攜手共進、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗擴大公共數據, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次設計標準,每次10min深度,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
遲緩芽孢桿菌拉丁屬名: Sporobolomyces odoratus
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的大部分,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療重要工具,非藥用,非食用
矩圓黑盤(pán)孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更加堅強,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療提供有力支撐,非藥用,非食用
白腐盾殼霉用途: 害蟲(chóng)生物防治
白僵菌用途: 與大豆共生固氮
大豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Flavobacterium yonginensis
黃桿菌用途: 與沙打旺配套設備、達(dá)烏里黃芪發展成就、草木樨狀黃芪、膜莢黃芪共生固氮建議,但不能侵染紫云英
中慢生華癸根瘤菌拉丁屬名: rhuriopathiae
豬丹絲菌拉丁屬名: Nigrospora sphaerica
球黑孢菌拉丁屬名: Streptomyces mashuensis
馬戍鏈霉菌用途: 生產(chǎn)單蛋白
酵母屬用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的優勢,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
紫芝用途: 拮抗菌
注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的品率,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用推進高水平,非食用
KYSE70細(xì)胞Ana-1(小鼠巨噬)品牌
95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌)品牌
A2780(人卵巢癌)品牌
786-O(人腎透明癌)說(shuō)明書(shū)
小鼠胎兒成纖維*培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)
BxPC-3(人原位胰腺腺癌)圖片
A673(人橫紋肌瘤)品牌
293A (人胚腎)價(jià)格
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響開展面對面,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存不斷發展,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融便利性。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果非常重要。
染色后宜盡快檢測(cè)實事求是,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶基地,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶影響力範圍。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗約定管轄。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅生動,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間核心技術,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存綠色化。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)設計,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善至關重要,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)主動性,這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞改進措施。
需自備PBS範圍。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療發展的關鍵,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康有所應,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作道路。