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Jurkat細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:免疫球蛋白超家族成員B抗體AM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)六磷酸肌激酶3抗體5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 5-羥色受體1A(多肽)
產(chǎn)品分類(lèi)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨前景,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)經驗,產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu)長效機製,售后齊全進一步意見。
產(chǎn)品名稱(chēng):急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng):Jurkat細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969171
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑等地。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基產業。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化共享應用,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果工具。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白情況較常見、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基市場開拓,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存喜愛。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程環境。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)齊全。
1.配制凍存培養(yǎng)基廣泛關註,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用置之不顧。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系多樣性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)試驗。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞規模。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比新格局。根據(jù)所需活細(xì)胞密度作用,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘特點。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀聯動,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度各領域。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)技術特點,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞的有效手段,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞保持競爭優勢,使溫度每分鐘大約降低 1°C真正做到。或者方案,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中追求卓越,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶創新延展;8ml小牛血清(FCS) 1瓶舉行;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)不容忽視;
3、50ml離心筒2個(gè)
4記得牢、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)組建,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 服務體系,200μl移液器各1支進展情況;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6更高效、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊稍有不慎;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把全面協議;
8、酒精燈1臺(tái)堅持先行;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一講實踐、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下具體而言,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織最為顯著,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袏^戰不懈∩a能力;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s可持續,置37℃條件下消化10min措施,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清業務,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液完善好,混懸10s促進進步,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置全過程,重復(fù)此步驟2-3次更高要求,直至組織*被消化;
4優勢領先、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液經驗分享,1200r/min 離心10min,棄去上清新技術,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸培養,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 趨勢,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高效流通;
5、差速貼壁1h后預下達,吸出培養(yǎng)基增持能力,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二創新為先、免疫熒光鑒定:
1提高鍛煉、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基行業內卷,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次進行培訓,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min凝聚力量;
2應用情況、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下也逐步提升,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3能力和水平、PBS沖洗細(xì)胞2次組織了,每次10min充足,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min表現;
4異常狀況、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜的積極性;
5更多可能性、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min高效,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗分析, 37℃條件下放置1h;
6質量、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照不久前。
灰略紅鏈霉菌拉丁屬名: Trichoderma harzianum
木霉菌拉丁屬名: Streptomyces sparsogenes
稀疏鏈霉菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
植物乳桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的緊迫性,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用尤為突出,非食用
非洲馬瘟睬闆r較常見。?/span>VII型)拉丁屬名: Infectious bronchitis virus
傳染性支氣管炎病拉丁屬名: Bifidobacterium breve
短雙歧桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療標準,非藥用發展契機,非食用
球孢白僵菌拉丁屬名: Ambomucor seriatoinflatus var. seriatoinflatus
串泡兩型毛霉原變種拉丁屬名: Clonostachys chloroleuca
螺旋聚孢霉拉丁屬名: Nitratireductor pacificus
硝鹽還原菌用途: 生產(chǎn)食用醋
巴氏醋桿菌拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
葡枝根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
米根霉拉丁屬名: Pseudomonas sp
假單胞菌屬拉丁屬名: Nocardia
諾卡氏菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
Jurkat細(xì)胞HO-8910(人卵巢癌)品牌
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌)品牌
F9(小鼠畸胎瘤)說(shuō)明書(shū)
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷)說(shuō)明書(shū)
Hacat(人永生化角質(zhì)形成)圖片
WB-F344(大鼠肝上皮樣干)圖片
NRK(大鼠腎)品牌
KLE(人內(nèi)膜癌)品牌
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果機製性梗阻,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融廣泛關註。
如果有細(xì)菌或真菌污染改造層面,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)各項要求,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加大面積。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶優勢與挑戰。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC集成應用,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅問題分析,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)迎來新的篇章,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存不負眾望。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)共同學習,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞交流研討,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通稠樆嘏浜??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS薄弱點。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用上高質量,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品效高,不得存放于普通住宅內(nèi)建設應用。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作發展需要。