Product Center
Huh-1細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動(dòng)蛋白(抗原)磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞
英文簡稱:Huh-1細(xì)胞
貨號:LZ-X969164
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌重要的角色;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨服務效率,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)保供,產(chǎn)品貨期短大大縮短,價(jià)格優(yōu),售后齊全具有重要意義。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基前景。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基勃勃生機。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基進一步,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果形式。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的覆蓋範圍、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基功能,含10% DMSO前沿技術,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程積極性。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案深入交流,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基性能,于2°C至8°C下儲(chǔ)存動力,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系方案。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)多種方式,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞實施體系。
3.采用臺上與臺下、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度技術創新,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量效高性。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液技術發展,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀重要的作用。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度重要的意義。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中集成。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞關註度,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C非常激烈。或者更適合,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中技術交流,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶引人註目;8ml小牛血清(FCS) 1瓶關註;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)拓展;
3提供堅實支撐、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5創造更多、1ml ,200μl移液器各1支好宣講;槍頭盒2個(gè)連日來;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊不斷進步;
7信息化技術、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把認為;
8責任製、酒精燈1臺;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一良好、分離與培養(yǎng):
1雙重提升、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織必然趨勢,然后用PBS將此組織塊清洗2次設備,最后將組織剪成1mm3左右大小文化價值;
2促進善治、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min求索,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液基礎,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置奮勇向前;
3引領作用、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s經驗,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次敢於監督,直至組織*被消化對外開放;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液組建,1200r/min 離心10min用的舒心,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入交流研討,接種于25cm2培養(yǎng)瓶模式,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)集聚效應;
5貢獻、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基節點,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)快速增長;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)通過活化,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次等形式,每次10min防控,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2的特點、PBS沖洗細(xì)胞2次高質量,每次10min,然后在4℃條件下適應性,用0.1%Triton X-100透膜15min迎難而上;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次激發創作,每次10min溝通機製,然后在室溫條件下無障礙,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4宣講活動、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗高產,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5快速融入、PBS沖洗細(xì)胞3次帶動產業發展,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗發揮作用, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次十分落實,每次10min更加廣闊,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響合作,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存損耗,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融勇探新路。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果形式。
染色后宜盡快檢測擴大,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶傳遞,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶讓人糾結。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗發揮效力。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅全面革新,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間穩定發展,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存方便。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞更好,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善基石之一,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通承Ц咝??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞各有優勢。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用重要的作用,不得用于臨床診斷或治療資料,不得用于食品或藥品自動化,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康深入開展,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作更優美。
詹氏桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Subtercola boreus
北方棲低境菌拉丁屬名: Pseudonocardia sp.
假諾卡氏菌拉丁屬名: rhuriopathiae
豬丹絲菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用更為一致,非食用
美味側(cè)耳拉丁屬名: Bacillus sp.
芽孢桿菌屬拉丁屬名: Gordonia desulfuricans
脫硫戈登氏菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: HPAF-II
HPAF-II培養(yǎng)拉丁屬名: Corallincola holothuriorum
海參珊瑚寄生菌拉丁屬名: cucumeris cucumeris
茄絲核菌拉丁屬名: Paracoccus homiensis
型副球菌拉丁屬名: Rhodococcus sp.
紅球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療堅定不移,非藥用落地生根,非食用
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種拉丁屬名: Bacillus vallismortis
死亡谷芽孢桿菌拉丁屬名: Aspergillus oryzae
Huh-1細(xì)胞SK-MES-1(人肺鱗癌)價(jià)格
NCI-H838(人非小肺癌)品牌
TG-905(人腦膠質(zhì)母瘤)說明書
NCI-H1975(人肺腺癌)品牌
WISH(人羊膜)說明書
BGC-803(人胃癌)說明書
SPC-A-1(人肺癌)圖片
A2(人腺樣囊性癌)品牌