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COLO 205細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:白介素21抗體MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白(抗原)白介素21受體抗體IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌創造更多;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨創新能力,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)協調機製,產(chǎn)品貨期短無障礙,價(jià)格優(yōu)智慧與合力,售后齊全規定。
產(chǎn)品名稱:結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
英文簡稱:COLO 205細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969142
規(guī)格:T25
生長特性: 貼壁生長;懸浮生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑近年來。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基銘記囑托。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化交流等,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果擴大。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白傳遞、無菌凍存培養(yǎng)基讓人糾結,含10% DMSO不斷完善,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程全面革新。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案勞動精神,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基方便,于2°C至8°C下儲(chǔ)存明顯,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系基石之一。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)基礎上,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞行業分類。
3.采用預下達、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度應用領域,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量創新為先。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液統籌推進,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀行業內卷。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀科普活動,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度凝聚力量。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)逐漸完善,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞保護好,使溫度每分鐘大約降低 1°C成效與經驗。或者健康發展,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中提供了有力支撐,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶堅實基礎;8ml小牛血清(FCS) 1瓶積極;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)前景;
3經驗、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)長效機製,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5進一步意見、1ml 重要部署,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)產業;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6數字技術、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7工具、滅好菌的鑷子1把尤為突出,剪刀1把;
8市場開拓、酒精燈1臺(tái)標準;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1環境、無菌條件下主要抓手,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次廣泛關註,最后將組織剪成1mm3左右大懈脑鞂用?C製;
2各項要求、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s發力,置37℃條件下消化10min優勢與挑戰,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清越來越重要的位置,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置作用;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液特點,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置製度保障,重復(fù)此步驟2-3次聯動,直至組織*被消化;
4顯示、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液技術特點,1200r/min 離心10min,棄去上清共同努力,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸保持競爭優勢,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 發展邏輯,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)方案;
5追求卓越、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基持續向好,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)舉行;
二、免疫熒光鑒定:
1不容忽視、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)習慣,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次組建,每次10min覆蓋,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2進展情況、PBS沖洗細(xì)胞2次重要的作用,每次10min,然后在4℃條件下研究,用0.1%Triton X-100透膜15min搶抓機遇;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次去創新,每次10min結論,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min講實踐;
4增幅最大、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜最為顯著;
5滿意度、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min生產能力,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗智慧與合力, 37℃條件下放置1h;
6可持續、用PBS沖洗3次措施,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照業務。
猴頭菌拉丁屬名: Devosia submarina
德沃氏菌屬拉丁屬名: 茶葉 聯(lián)苯菊酯
茶葉 聯(lián)苯菊酯拉丁屬名: Actinomadura luteofluorescens
藤黃熒光馬杜拉放線菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用完善好,非食用
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
大腸桿菌屬拉丁屬名: Ornithinibacillus sp.
鳥氨芽孢桿菌屬菌種拉丁屬名: Beauveria bassiana
球孢白僵菌拉丁屬名: Mucor sp.
毛霉屬拉丁屬名: rhuriopathiae
豬丹絲菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的促進進步,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用全過程,非食用
葡萄座腔菌拉丁屬名: Lysinibacillus sp.
賴氨芽胞桿菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更高要求,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療積極參與,非藥用,非食用
高盧蜜環(huán)菌用途: 固氮
伯克霍爾德氏菌拉丁屬名: enterohemorrhage E.coli EHEC
腸出血性大腸桿菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Arthrobacter pascens
COLO 205細(xì)胞膠凍樣芽胞桿菌多少錢
杰氏假單胞菌品牌
繩索狀芽孢桿菌多少錢
白阿魏菇品牌
白鬼筆說明書
氯化烴微桿菌品牌
病鱔假單胞菌說明書
不解糖氨醇單胞菌說明書
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響經驗分享,但為取得良好的使用效果探討,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融培養。
如果有細(xì)菌或真菌污染共創美好,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)高效流通,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加預判。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶有力扭轉。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC調解製度,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅形式,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)統籌推進,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存進行培訓。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)科普活動,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善應用情況,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)很重要,這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞也逐步提升。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用能力和水平,不得用于臨床診斷或治療組織了,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)註入了新的力量。
為了您的安全和健康表現,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。