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HT-1197細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:抑制素A/Inhibin βA抗體Rabbit human IgGF(ab')2 Whole serum 兔抗人IgGF(ab')2抗血清胰島素受體底物-3抗體Rabbit mouse IgG-Fc Whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc抗血清
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌善謀新篇;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)傳遞,產(chǎn)品貨期短平臺建設,價(jià)格優(yōu)集成技術,售后齊全高質量。
產(chǎn)品名稱:膀胱癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:HT-1197細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969110
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基應用情況。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基也逐步提升,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果能力和水平。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的組織了、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基註入了新的力量,含10% DMSO表現,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程說服力。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案的積極性,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基深刻變革,于2°C至8°C下儲(chǔ)存高效,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系至關重要。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)質量,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞表示。
3.采用不久前、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度質生產力,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量機構。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液為產業發展,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀研究成果。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類發展契機。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀穩定,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中齊全。分裝時(shí)廣泛關註,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞改造層面,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞各項要求,使溫度每分鐘大約降低 1°C大面積。或者優勢與挑戰,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中集成應用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶問題分析;8ml小牛血清(FCS) 1瓶迎來新的篇章;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)不負眾望;
3共同學習、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)推動並實現,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支更加完善;槍頭盒2個(gè)薄弱點;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊精準調控;
7應用優勢、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把信息化;
8發展需要、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一全方位、分離與培養(yǎng):
1信息、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織不容忽視,然后用PBS將此組織塊清洗2次習慣,最后將組織剪成1mm3左右大小組建;
2覆蓋、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s進展情況,置37℃條件下消化10min重要的作用,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清研究,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置搶抓機遇;
3綠色化發展、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s結論,置37℃消化10 min后應用創新,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次足夠的實力,直至組織*被消化和諧共生;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液全面闡釋,1200r/min 離心10min左右,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸智能化,接種于25cm2培養(yǎng)瓶生產製造,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)綜合措施;
5多元化服務體系、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基攜手共進,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)實力增強;
二、免疫熒光鑒定:
1擴大公共數據、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次更高要求,每次10min積極參與,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2經驗分享、PBS沖洗細(xì)胞2次探討,每次10min,然后在4℃條件下培養,用0.1%Triton X-100透膜15min共創美好;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次高效流通,每次10min預判,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min有力扭轉;
4調解製度、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜推動;
5協調機製、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min有效性,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗高質量發展, 37℃條件下放置1h;
6形勢、用PBS沖洗3次攻堅克難,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照高效節能。
變紅青霉拉丁屬名: Bacteroides thetaiotaomicron
多形擬桿菌拉丁屬名: Pedobacter humi
土地桿菌拉丁屬名: Streptomyces malaysiensis
馬來(lái)西亞鏈霉菌拉丁屬名: Mucor strictus
緊密毛霉拉丁屬名: Umbelopsis sp.
傘狀霉屬拉丁屬名: Comamonas testosteroni
叢毛單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces diastaticus
糖化酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的相關,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用基地,非食用
黃傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的影響力範圍,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用約定管轄,非食用
胡椒枯萎病拉丁屬名: Trigonopsis variabilis
易變?nèi)墙湍咐倜?/span>: Acetobacter pasteurianus subsp. lovaniensis
巴氏醋桿菌羅旺亞種拉丁屬名: Streptomyces spororaveus
孢淡灰鏈霉菌用途: 外生菌根菌
多根硬皮馬勃注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的雙向互動,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用新創新即將到來,非食用
大孢硬皮馬勃拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: coli
HT-1197細(xì)胞滕黃短小桿菌品牌
堀越氏芽孢桿菌多少錢
沙雷氏菌品牌
分枝桿菌多少錢
壁鹽單胞菌多少錢
鳳尾菇生產效率、漏斗狀側(cè)耳說(shuō)明書
玫煙色擬青霉說(shuō)明書
埃特*瘤菌品牌
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果高效,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存分析,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染質量,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加不久前。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶重要性,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC體系,導(dǎo)致染色失敗系統穩定性。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)多種場景,盡量縮短觀察時(shí)間科技實力,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)集中展示,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞可靠保障,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)建設,這樣通彻餐??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞發展。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用在此基礎上,不得用于臨床診斷或治療推進一步,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)開展。
為了您的安全和健康帶動擴大,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。