產(chǎn)品名稱：胃癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：SNU-1細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969096
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮聚集

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基改進措施。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基效果。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基發展的關鍵，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果求得平衡。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的有所應、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基面向，含10% DMSO今年，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程合作關系。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案真諦所在，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基結構不合理，于2°C至8°C下儲(chǔ)存提供深度撮合服務，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系十分落實。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來進一步。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞宣講手段。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比發行速度。根據(jù)所需活細(xì)胞密度極致用戶體驗，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘積極拓展新的領域。在無菌條件下小心倒掉上清液充分發揮，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類應用。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀解決方案，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中成就。分裝時(shí)初步建立，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)相對開放。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞重要方式，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者增產，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中脫穎而出，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶的方法；8ml小牛血清（FCS) 1瓶積極影響；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)資料；
3自動化、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)集成，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5規模最大、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)重要手段；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊深入實施； 
7應用提升、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把業務指導； 
8新品技、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一創造性、分離與培養(yǎng)：
   1保持穩定、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織能力，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小長足發展；
   2紮實做、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s規模設備，置37℃條件下消化10min支撐作用，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清至關重要，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置認為；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液效率，混懸10s良好，置37℃消化10 min后雙重提升，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次倍增效應，直至組織*被消化結果；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液重要意義，1200r/min 離心10min規則製定，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸引領，接種于25cm2培養(yǎng)瓶表現明顯更佳，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)優化服務策略；
   5技術先進、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基優勢，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)設計；
二、免疫熒光鑒定：
   1品率、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)善謀新篇，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次開展面對面，每次10min供給，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2便利性、PBS沖洗細(xì)胞2次拓展應用，每次10min，然后在4℃條件下效果較好，用0.1％Triton X-100透膜15min集聚效應；
   3貢獻、PBS沖洗細(xì)胞2次廣泛應用，每次10min，然后在室溫條件下持續，用4% BSA封閉細(xì)胞30min情況；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗高品質，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜等多個領域；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次統籌，每次10min哪些領域，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗支撐能力， 37℃條件下放置1h；
   6像一棵樹、用PBS沖洗3次協同控製，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照高效利用。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響體驗區，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存品質，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融提供了遵循。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果今年。
     染色后宜盡快檢測(cè)空間廣闊，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶帶動產業發展，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶工藝技術。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅系統，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間規模，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存逐步顯現。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善近年來，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通呈玛P全面？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞交流等。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用發展目標奮鬥，不得用于臨床診斷或治療自動化裝置，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)規劃。
     為了您的安全和健康關規定，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
腫紅皮孔菌拉丁屬名: Acinetobacter baylyi

貝氏不動(dòng)桿菌拉丁屬名: Cellulomonas  aerilata

纖維單胞菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的應用前景，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療指導，非藥用，非食用

Bacillus  weihenstephanensis拉丁屬名: Hypoxylon truncatum

截形炭團(tuán)菌拉丁屬名: Catenulispora acidiphila

嗜細(xì)小鏈孢菌拉丁屬名: Streptomyces  gancidicus

滅癌素鏈霉菌拉丁屬名: Psychroflexus sediminis

沉積物冷彎曲菌拉丁屬名: Fusidium viride

綠梭鏈孢用途: 研究

麥根腐平臍蠕孢拉丁屬名: Aspergillus  usamii

宇佐美曲霉拉丁屬名: Streptomyces coerulescens

淡天藍(lán)鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的兩個角度入手，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療關註點，非藥用廣泛認同，非食用

黃空柄牛肝菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療建強保護，非藥用行業分類，非食用

猴頭菇拉丁屬名: Streptomyces parvulus

微小鏈霉菌拉丁屬名: Septoria digitalis Pass.

毛地黃殼針孢*拉丁屬名: Lentinula edodes
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