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小鼠P-選擇素糖蛋白配體1elisa檢測試劑盒?操作步驟

更新時間:2021-07-28點擊次數(shù):1070

小鼠P-選擇素糖蛋白配體1elisa檢測試劑盒操作步驟:

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1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔規模,在di一堅持先行、第二孔中分別加標準品100μl首次,然后在di一發揮效力、第二孔中加標準品稀釋液50μl橋梁作用,混勻拓展;然后從di一孔生產創效、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔空白區,再在第三模樣、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻處理方法;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉數據顯示,再各取50μl分別加到第五、第六孔中服務,再在第五實現、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻舉行;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中習慣,再在第七記得牢、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl組建,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九服務體系、第十孔中進展情況,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉特點。(稀釋后各孔加樣量都為50μl研究,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 綠色化發展,60 ng/L背景下,30 ng/設計標準,15 ng/L)聯動。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑至關重要,其余各步操作相同)、待測樣品孔慢體驗。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)全會精神。加樣將樣品加于酶標板孔底部左右,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻智能化。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘生產製造。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜綜合措施,棄去液體取得了一定進展,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去有所增加,如此重復5次,拍干促進進步。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl供給,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3更高要求。

8. 洗滌:操作同5積極參與。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl經驗分享,輕輕震蕩混勻探討,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)培養。

11. 測定:以空白空調零共創美好,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)趨勢。 測定應在加終止液后15分鐘。

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