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小鼠P-選擇素糖蛋白配體1elisa檢測(cè)試劑盒?操作步驟

更新時(shí)間:2021-07-28點(diǎn)擊次數(shù):999

小鼠P-選擇素糖蛋白配體1elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:

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1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔需求,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl現場,然后在di一線上線下、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl廣泛關註,混勻解決方案;然后從di一孔應用提升、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl活動上,混勻達到;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五大型、第六孔中的可能性,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul不可缺少,混勻系列;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七服務為一體、第八孔中方案,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl相互配合,混勻后從第七進一步完善、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中提升,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl影響,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl競爭力,濃度分別為180 ng/L製高點項目,120 ng/L ,60 ng/L的過程中,30 ng/物聯與互聯,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑延伸,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔要求。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部運行好,盡量不觸及孔壁國際要求,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘同期。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用新趨勢。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體鍛造,甩干新體系,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次搖籃,拍干持續創新。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外使用。

7. 溫育:操作同3分析。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl不難發現,再加入顯色劑B50μl合規意識,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl醒悟,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)進行部署。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)高效利用。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘體驗區。

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