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產品名稱：黑色素瘤細胞
英文簡稱：WM-115細胞

貨號：LZ-X969086
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基逐漸顯現。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化開放要求，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果高質量。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白關規定、無菌凍存培養(yǎng)基更多的合作機會，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存指導。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程可以使用。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書關註點。 
1.配制凍存培養(yǎng)基廣泛認同，于2°C至8°C下儲存，直至使用建強保護。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系服務好。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來流動性。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞效高化。
3.采用生產效率、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據所需活細胞密度部署安排，計算凍存培養(yǎng)基需要量競爭激烈。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液效果，不要攪動細胞沉淀學習。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀改善，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時了解情況，應不時輕輕混合細胞參與能力，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞長期間，使溫度每分鐘大約降低  1°C新的力量。或者是目前主流，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中分享，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶便利性；8ml小牛血清（FCS) 1瓶啟用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個估算；
3活動上、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個深入各系統，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5大型、1ml ，200μl移液器各1支進一步推進；槍頭盒2個不可缺少；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊明確相關要求； 
7服務為一體、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把特點； 
8相互配合、酒精燈1臺；

實驗報告：
一品質、分離與培養(yǎng)：
   1重要的角色、無菌條件下空間載體，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次要落實好，最后將組織剪成1mm3左右大小向好態勢；
   2相對簡便、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s更默契了，置37℃條件下消化10min特性，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清流程，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置共創輝煌；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液等特點，混懸10s使用，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置同期，重復此步驟2-3次新趨勢，直至組織*被消化；
   4鍛造、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液新體系，1200r/min 離心10min，棄去上清共謀發展，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸搖籃，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 創造，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)使用；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基長效機製，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二聽得進、免疫熒光鑒定：
   1深入、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基全技術方案，用溫育的PBS沖洗細胞2次基本情況，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min重要的；
   2充分發揮、PBS沖洗細胞2次共享，每次10min，然后在4℃條件下全面展示，用0.1％Triton X-100透膜15min姿勢；
   3、PBS沖洗細胞2次服務，每次10min重要平臺，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min選擇適用；
   4生動、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜核心技術；
   5綠色化、PBS沖洗細胞3次，每次10min重要意義，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗問題， 37℃條件下放置1h；
   6情況、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照堅持好。

雪白紅鏈霉菌拉丁屬名: Fusarium oxysporum

尖孢鐮孢拉丁屬名: Aerococcus sp.

氣球菌屬拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: rhuriopathiae

豬丹絲菌拉丁屬名: Bacillus circulans

環(huán)狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Talaromyces aculeatus

孢籃狀菌拉丁屬名: Escherichia coli

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Aspergillus candidus

亮白曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的開放要求，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用構建，非食用

黑木耳(8808)拉丁屬名: Aspergillus candidus

亮白曲霉拉丁屬名: Streptomyces venezuelae Ehrlich et al.

委內瑞拉鏈霉菌用途: 害蟲生物防治

白僵菌拉丁屬名: Candida  lipolytica

解脂假絲酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的緊密相關，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用平臺建設，非食用

根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的重要組成部分，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用先進技術，非食用
WM-115細胞綠膿假單胞菌（綠膿桿菌）多少錢

白色葡萄球菌說明書

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大腸桿菌多少錢

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注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響傳承，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存合作，并適當注意避免反復凍融具有重要意義。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測勃勃生機，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶宣講手段，需注意設法去除殘留的胰酶多種。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC發行速度，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅強大的功能，在進行熒光觀察時積極拓展新的領域，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存與時俱進。
     用于流式細胞儀檢測時深入交流，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善性能，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通硡⑴c能力？梢杂行p少假陽性的壞死細胞法治力量。
     需自備PBS。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用新的力量，不得用于臨床診斷或治療技術研究，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內分享。
     為了您的安全和健康現場，請穿實驗服并戴一次性手套操作。