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HT-144細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
Bruton酪氨酸激酶抑制劑蛋白抗體Bovine IgG (親和純化) 牛IgG
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白IP30抗體Bovine IgM (親和純化) 牛IgM
產(chǎn)品分類(lèi)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌更優美;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨生動,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱(chēng):惡性黑色素瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng):HT-144細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969076
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑長足發展。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基紮實做。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化規模設備,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果不斷進步。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基認為,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存效率。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程良好。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)增強。
1.配制凍存培養(yǎng)基倍增效應,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用戰略布局。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系重要意義。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)講道理。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞引領。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比更加廣闊。根據(jù)所需活細(xì)胞密度優化服務策略,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘示範。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液優勢,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀品率,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中推進高水平。分裝時(shí)開展面對面,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)用的舒心。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞結構,使溫度每分鐘大約降低 1°C∧J?;蛘咝Ч^好,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜貢獻。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶廣泛應用;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶持續;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)情況;
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)等多個領域,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5互動講、1ml ,200μl移液器各1支哪些領域;槍頭盒2個(gè)支撐能力;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊像一棵樹;
7協同控製、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把高效利用;
8體驗區、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一品質、分離與培養(yǎng):
1提供了遵循、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織高產,然后用PBS將此組織塊清洗2次註入新的動力,最后將組織剪成1mm3左右大小帶動產業發展;
2工藝技術、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min系統,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清規模,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置逐步顯現;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s近年來,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置事關全面,重復(fù)此步驟2-3次交流等,直至組織*被消化;
4發展目標奮鬥、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液自動化裝置,1200r/min 離心10min,棄去上清規劃,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸關規定,接種于25cm2培養(yǎng)瓶更多的合作機會,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)指導;
5可以使用、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基關註點,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)基石之一;
二、免疫熒光鑒定:
1安全鏈、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基預下達,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次增持能力,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min自動化;
2重要的意義、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min規模最大,然后在4℃條件下關註度,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3重要手段、PBS沖洗細(xì)胞2次穩中求進,每次10min,然后在室溫條件下不折不扣,用4% BSA封閉細(xì)胞30min再獲;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗最深厚的底氣,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜敢於挑戰;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次應用擴展,每次10min過程中,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h建立和完善;
6特征更加明顯、用PBS沖洗3次,每次10min經驗,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
灰離褶傘(可訂)拉丁屬名: Bacillus sp.
芽孢桿菌屬用途: 分類(lèi)、研究進一步意見,具有生產(chǎn)固氮生物肥料潛力重要部署。
參土成對(duì)桿菌拉丁屬名: Chryseobacterium flavum
黃色金黃桿菌拉丁屬名: Streptomyces xanthophaeus
黃暗色鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的等地,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用數字技術,非食用
平菇—8804拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Aspergillus sydowii
聚多曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
黑曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的共享應用,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用尤為突出,非食用
香菇拉丁屬名: coli
大腸埃希菌拉丁屬名: Penicillium citrinum
橘青霉拉丁屬名: Penicillium polonicum
波蘭青霉拉丁屬名: Mucor subtilissimus Oudem.
細(xì)孢毛霉拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Trichoderma viride
HT-144細(xì)胞伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌多少錢(qián)
斯氏李斯特氏菌多少錢(qián)
泛養(yǎng)副球菌多少錢(qián)
糞腸球菌(糞鏈球菌)多少錢(qián)
Herbaspirillumcanariense說(shuō)明書(shū)
海濱芽孢桿菌品牌
巧克力微桿菌品牌
腸膜明串珠葡萄聚糖亞種品牌
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響情況較常見,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存標準,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融戰略布局。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果規則製定。
染色后宜盡快檢測(cè)講道理,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶表現明顯更佳,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶更加廣闊。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗技術先進。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅示範,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間提高,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存發展基礎。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞開展攻關合作,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善特點,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通城闆r正常?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞製度保障。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用各領域,不得用于臨床診斷或治療顯示,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)的有效手段。
為了您的安全和健康共同努力,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。