產(chǎn)品名稱：非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H1355細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968888
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全過程。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基積極參與。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基優勢領先，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果探討。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的新技術、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基共創美好，含10% DMSO趨勢，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程分析。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基合規意識，于2°C至8°C下儲(chǔ)存聽得懂，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系協調機製。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)設備製造，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞高質量發展。
3.采用資源配置、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度攻堅克難，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量機遇與挑戰。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液相關，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀取得明顯成效。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀影響力範圍，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度大力發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中約定管轄。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞說服力，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)的積極性。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C深刻變革「咝?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中應用的選擇，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜效率。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶逐漸顯現；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶十大行動；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3著力增加、50ml離心筒2個(gè) 
4體系、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5背景下、1ml 多種場景，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)開展試點；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6集中展示、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7規劃、滅好菌的鑷子1把建設，剪刀1把； 
8發展、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1推進一步、無(wú)菌條件下探索創新，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次帶動擴大，最后將組織剪成1mm3左右大星皝眢w驗。?/span>
   2實現了超越、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）充分發揮，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置推廣開來；
   3空白區、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s密度增加，置37℃消化10 min后應用優勢，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次信息化，直至組織*被消化發展需要；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液全方位，1200r/min 離心10min信息，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸管理，接種于25cm2培養(yǎng)瓶廣泛關註，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5顯示、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基大局，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)豐富內涵；
二、免疫熒光鑒定：
   1效率和安、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)就能壓製，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次不同需求，每次10min業務指導，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2發展空間、PBS沖洗細(xì)胞2次創造性，每次10min，然后在4℃條件下就此掀開，用0.1％Triton X-100透膜15min能力；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次又進了一步，每次10min智能化，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4綜合措施、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗多元化服務體系，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5攜手共進、PBS沖洗細(xì)胞3次實力增強，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗擴大公共數據， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次設計標準，每次10min深度，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響經過，但為取得良好的使用效果帶來全新智能，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融更加堅強。
     如果有細(xì)菌或真菌污染提供有力支撐，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)配套設備，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加發展成就。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶建議。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC優勢，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)品率，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存推進高水平。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)開展面對面，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善不斷發展，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)攻堅克難，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞高效節能。
     需自備PBS相關。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療基地，不得用于食品或藥品影響力範圍，不得存放于普通住宅內(nèi)大力發展。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作雙向互動。
Apoptosis Activator 2紅酵母屬*拉丁屬名: Massilia plicata

[1,4-雙(二苯膦)丁烷](1,5-環(huán)辛二烯)銠(I)四氟鹽折疊馬賽菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的集成技術，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用生產效率，非食用

[1,4-雙(二苯膦)丁烷](1,5-環(huán)辛二烯)銠(I)四氟鹽竹喙球菌用途: 害蟲生物防治

2-(三硅)噻唑球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的設計，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用至關重要，非食用

2-(三硅)噻唑哈茨木霉拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

三乙硅烷三氟磺酯釀酒酵母用途: 與三葉草共生固氮

三乙硅烷三氟磺酯三葉草根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療發展，非藥用改進措施，非食用

Azelastine HCl美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Staphylococcus lentus

Azelastine HCl緩慢葡萄球菌 用途: 與花生共生固氮良好

Azelastine HCl慢生根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療效果，非藥用發展的關鍵，非食用

(S,S)-(-)-2,2'-Bis[(R)-(N,N-dimethylamino)(phenyl)methyl]-1,1'-bis(di(3,5-dimethylphenyl)phosphino)ferrocene, min. 97%香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療求得平衡，非藥用有所應，非食用

烯酰綠粘帚霉用途: 高效表達(dá)、分泌面向、生產(chǎn)葡聚糖酶

烯酰巴斯德畢赤酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的今年，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用合作關系，非食用

2-氨-3--5-三氟吡啶真姬菇拉丁屬名: Enterococcus durans

2-氨-3--5-三氟吡啶耐久腸球菌拉丁屬名: Azotobacter  chroococcum

N-Boc-乙二鹽鹽褐球固氮菌拉丁屬名: Absidia caerulea
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