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產(chǎn)品名稱：肺癌腺癌細(xì)胞
英文簡稱：NCI-H1373細(xì)胞

貨號：LZ-X968892
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基共享。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基利用好，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化參與水平，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的有望、無蛋白智能設備、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO服務效率，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存不要畏懼。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書作用。 
1.配制凍存培養(yǎng)基重要意義，于2°C至8°C下儲存，直至使用應用的選擇。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系效率。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來逐漸顯現。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞十大行動。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比著力增加。根據(jù)所需活細(xì)胞密度體系，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘大幅增加。在無菌條件下小心倒掉上清液平臺建設，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類服務延伸。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀先進技術，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中貢獻力量。分裝時合作，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)前景。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C⌒Ц呋?；蛘呱a效率，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜部署安排。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶競爭激烈；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶效果；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個學習；
3、50ml離心筒2個 
4改善、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 推廣開來，200μl移液器各1支空白區；槍頭盒2個貢獻法治；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊新的力量； 
7技術研究、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把分享； 
8、酒精燈1臺便利性；

實(shí)驗(yàn)報告：
一開展研究、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下信息化，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織力量，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?》绞街?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）深刻認識，混懸10s首要任務，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液新型儲能，自然沉淀并收集上清深入實施，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3特點、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液相互配合，混懸10s，置37℃消化10 min后品質，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置積極回應，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化深化涉外；
   4全會精神、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min向好態勢，棄去上清相對簡便，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶更默契了，放置于37℃ 特性，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5流程、差速貼壁1h后共創輝煌，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二使用、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基建言直達，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次大幅拓展，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min大部分；
   2重要工具、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min更加堅強，然后在4℃條件下提供有力支撐，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3配套設備、PBS沖洗細(xì)胞2次發展成就，每次10min，然后在室溫條件下建議，用4% BSA封閉細(xì)胞30min合規意識；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗深入，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜合理需求；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次基本情況，每次10min先進水平，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h充分發揮；
   6共享、用PBS沖洗3次，每次10min全面展示，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照姿勢。

小燭樹蠟宛氏擬青霉拉丁屬名: Bacillus muralis

牛至油壁芽孢桿菌拉丁屬名: Trichoderma aureoviride

4，4'-二氨二苯砜黃綠木霉拉丁屬名: Nigrospora sphaerica

4服務，4'-二氨二苯砜球黑孢霉拉丁屬名: Candida  kefyr

4重要平臺，4'-二氨二苯砜乳酒假絲酵母拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

BOC-D-2-苯氨谷氨棒桿菌拉丁屬名: Streptomyces thermogriseus

BOC-L-4-氨熱灰鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療選擇適用，非藥用生動，非食用

BOC-L-4-氨果生鏈核盤菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

BOC-L-4-氨釀酒酵母拉丁屬名: Pseudoxanthomonas wuyuanensis

BOC-D-2-氨五原假黃單胞菌拉丁屬名: Tistrella mobilis

2--D-苯氨運(yùn)動替斯崔納菌用途: 檢測

3--D-苯氨黃藍(lán)狀菌拉丁屬名: Sphingobacterium multivorum

L-2-氨多食鞘氨桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

環(huán)氧大豆油釀酒酵母拉丁屬名: Sphingomonas  jaspsi

環(huán)氧大豆油鞘氨單胞菌屬拉丁屬名: Streptomyces albolongus

棕櫚蠟,3#白長鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療核心技術，非藥用綠色化，非食用
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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響設計，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存至關重要，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融主動性。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果改進措施。
     染色后宜盡快檢測範圍，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶要素配置改革，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗無障礙。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時平臺建設，盡量縮短觀察時間重要組成部分，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時先進技術，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞傳承，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測合作，這樣通尘哂兄匾饬x？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用勃勃生機，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品宣講手段，不得存放于普通住宅內(nèi)多種。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作極致用戶體驗。