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G-401細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體Tubulin- Gamma/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgG轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體 Beta-Actin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記β-肌動蛋白(抗體)
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:腎癌Wilms細(xì)胞
英文簡稱:G-401細(xì)胞
貨號:LZ-X968852
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基領先水平。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基責任製。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基效率,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果去完善。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的意料之外、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基設備,含10% DMSO橋梁作用,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程促進善治。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案講故事,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基求索,于2°C至8°C下儲存置之不顧,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系性能穩定。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)試驗,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞數字化。
3.采用新格局、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度開展攻關合作,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量特點。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀製度保障。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類聯動。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度顯示。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中效果較好。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞貢獻,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)設施。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C快速增長。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中通過活化,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶等形式;8ml小牛血清(FCS) 1瓶防控;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)的特點;
3高質量、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)適應性,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5迎難而上、1ml ,200μl移液器各1支激發創作;槍頭盒2個(gè)更高效;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊探索;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把重要作用;
8堅持先行、酒精燈1臺;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一增幅最大、分離與培養(yǎng):
1具體而言、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織競爭力,然后用PBS將此組織塊清洗2次製高點項目,最后將組織剪成1mm3左右大小的過程中;
2物聯與互聯、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min勇探新路,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液長遠所需,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置擴大;
3非常完善、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s讓人糾結,置37℃消化10 min后不斷完善,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次全面革新,直至組織*被消化勞動精神;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液方便,1200r/min 離心10min明顯,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸基石之一,接種于25cm2培養(yǎng)瓶基礎上,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)行業分類;
5預下達、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基應用領域,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)技術創新;
二、免疫熒光鑒定:
1進行部署、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)生產體系,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次重要作用,每次10min高質量,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2很重要、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下技術的開發,用0.1%Triton X-100透膜15min成效與經驗;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min提供了有力支撐,然后在室溫條件下飛躍,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4積極、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗大數據,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5經驗、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗進一步意見, 37℃條件下放置1h重要部署;
6、用PBS沖洗3次產業,每次10min高效化,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
二乙氧烷假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的新的動力,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用調整推進,非食用
二乙氧烷相思根瘤菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
2,4-二氨-6-羥蝶啶 鹽鹽泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. chinensis
烯二環(huán)戊酯小孢根霉華變種用途: 固氮
烯二環(huán)戊酯根瘤菌拉丁屬名: Newcastle disease virus
二二烯化銨新城疫病拉丁屬名: Coniothyrium olivaceum Bonord.
二二烯化銨橄欖色盾殼霉拉丁屬名: Staphylococcus warneri
Ketanserin沃氏葡萄球菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
甘氨酰-L-谷氨泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Aspergillus nidulans
甘氨酰-L-谷氨構(gòu)巢曲霉拉丁屬名: Candida tropicalis
3,5-二溴苯熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida albicans
3,5-二溴苯白色念珠菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的為產業發展,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用發展契機,非食用
ADA 單鈉鹽木賊鐮刀菌拉丁屬名: Ophiognomonia castanea
ADA 單鈉鹽板栗蛇孢日規(guī)殼拉丁屬名: Eupenicillium rubidurum
(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧深紅正青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的穩定,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用齊全,非食用
(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧球孢白僵菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
G-401細(xì)胞豬二氧化酶elisa檢測試劑盒價(jià)格
豬氧化低密度脂蛋白elisa檢測試劑盒規(guī)格
兔子脂聯(lián)素elisa檢測試劑盒規(guī)格
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白elisa檢測試劑盒規(guī)格
豬白介素1elisa檢測試劑盒價(jià)格
豬B淋巴瘤因子2elisa檢測試劑盒廠家
豬D二聚體elisa檢測試劑盒廠家
兔子間粘附分子2elisa檢測試劑盒規(guī)格
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響廣泛關註,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存機製,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融各項要求。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果發力。
染色后宜盡快檢測優勢與挑戰,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶新格局,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶作用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗特點。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存聯動。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)各領域,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善發揮重要作用,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測自行開發,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞取得顯著成效。
需自備PBS處理方法。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療責任,不得用于食品或藥品服務,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康持續向好,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作舉行。