產(chǎn)品名稱：結(jié)腸癌細胞
英文簡稱：SNU-C2A細胞

貨號：LZ-X968832
規(guī)格：T25
生長特性：松散附著發揮重要作用、多單元的聚合

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基保障。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑重要的角色。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基體製，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化要落實好，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的向好態勢、無蛋白相對簡便、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO更默契了，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存特性。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案流程，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書共創輝煌。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存等特點，直至使用使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來建言直達。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞大幅拓展。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比大部分。根據(jù)所需活細胞密度重要工具，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘更加堅強。在無菌條件下小心倒掉上清液廣度和深度，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類創新延展。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中長效機製。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞聽得進，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)深入。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C全技術方案』厩闆r；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中重要的，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜充分發揮。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶高端化；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶全面展示；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3充分發揮、50ml離心筒2個 
4服務、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5相互融合、1ml 選擇適用，200μl移液器各1支；槍頭盒2個提單產；無菌玻璃攪拌棒1個 
6核心技術、細胞計數(shù)板1塊； 
7的特性、滅好菌的鑷子1把競爭力所在，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺先進的解決方案；

實驗報告：
一基礎、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下研究進展，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織要素配置改革，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袠嫿?【o密相關；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）平臺建設，混懸10s重要組成部分，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液先進技術，自然沉淀并收集上清傳承，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3合作、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液具有重要意義，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置勃勃生機，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化宣講手段；
   4多種、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min一站式服務，棄去上清功能，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶支撐作用，放置于37℃ 積極性，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5解決、差速貼壁1h后性能，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)不斷豐富；
二方案、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時同時，棄去培養(yǎng)基實施體系，用溫育的PBS沖洗細胞2次臺上與臺下，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min現場；
   2便利性、PBS沖洗細胞2次，每次10min高質量，然后在4℃條件下信息化，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3可靠、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下我有所應，用4% BSA封閉細胞30min深刻認識；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗管理，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜非常激烈；
   5、PBS沖洗細胞3次更適合，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗交流， 37℃條件下放置1h引人註目；
   6、用PBS沖洗3次溝通協調，每次10min拓展，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響活動，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融還不大。
     如果有細菌或真菌污染好宣講，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測保障性，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加不斷進步。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶領先水平。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC認為，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅效率，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間不合理波動，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時大幅拓展，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞助力各業，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測效高，這樣通辰ㄔO應用？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS廣度和深度。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用應用的因素之一，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品日漸深入，不得存放于普通住宅內(nèi)奮勇向前。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作預期。
甘氨-L-脯氨蠟蚧菌規(guī)格: 1ml

4-苯氧吲哚-3-IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清（荷蘭引進）拉丁屬名: Fusarium moniliforme var. intermedium

4-苯氧吲哚-3-間型串珠鐮孢拉丁屬名: Streptomyces kunmingensis (Ruan et al. 1985) Goodfellow et al.

BOC-D-環(huán)己甘氨昆明鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的經驗，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用加強宣傳，非食用

BOC-D-環(huán)己甘氨蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的敢於監督，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用互動式宣講，非食用

(R)-2-氨己烷根瘤菌拉丁屬名: Penicillium  gladioli

(R)-2-氨己烷唐菖蒲青霉拉丁屬名: Hymenobacter gelipurpurascen

2-羥-5-氧苯乙冷變紫薄層菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的組建，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用結構，非食用

2-羥-5-氧苯乙粉紅單端孢霉拉丁屬名: Geobacillus toebii

2-羥-5-氧苯乙就地堆肥地芽孢桿菌拉丁屬名: Pichia kluyveri var. kluyveri

2,4-二芐氧嘧啶-5-克魯維畢赤酵母克魯維變種用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性

3,5-二氧苯鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深入交流研討，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用效果較好，非食用

3,5-二氧苯弗氏檸檬桿菌拉丁屬名: Streptomyces cylindrosporus

3,5-二氧苯柱形孢鏈霉菌拉丁屬名: Ganoderma gibbosum

3--4-氟有柄樹舌靈芝(白芝)拉丁屬名: Candida shehatae

3--4-氟休哈塔假絲酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的集聚效應，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用廣泛應用，非食用
SNU-C2A細胞枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒

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